β內(nèi)酰胺類抗生素顏色反應(yīng)快速鑒別系統(tǒng)

1、β－內(nèi)酰胺類抗生素快速鑒別系統(tǒng),◆β－內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)特點和分類◆β－內(nèi)酰胺類抗生素的化學(xué)系統(tǒng)鑒別的總體思路◆β－內(nèi)酰胺類抗生素的化學(xué)系統(tǒng)鑒別的具體方法與步驟◆β－內(nèi)酰胺類抗生素的操作要點及注意事項,β－內(nèi)酰胺類抗生素包含的品種較多，劑型幾乎覆蓋了抗生素類藥品所能應(yīng)用的全部劑型。,β－內(nèi)酰胺類抗生素的結(jié)構(gòu)特點（共性）,母核含有四元β-內(nèi)酰胺環(huán)。,結(jié)構(gòu)分類,β-內(nèi)酰胺類藥物按駢合環(huán)可分為青霉素（駢合五元氫化噻唑環(huán)）、頭孢

2、菌素（駢合六元氫化噻嗪環(huán)）及碳青霉烯類三類。,青霉素類,頭孢菌素類,碳青霉烯類,采用羥肟酸鐵反應(yīng)可直接快速初步區(qū)分大部分β-內(nèi)酰胺類抗生素與其他藥物，且根據(jù)顏色的差異快速區(qū)分青霉素類與頭孢菌素藥物．,可疑的β-內(nèi)酰胺類抗生素,,羥肟酸鐵反應(yīng),,,假藥,β-內(nèi)酰胺類抗生素,,,青霉素類,頭孢類,深紅色,桔紅色,,（一）呈色反應(yīng),1. 羥肟酸鐵反應(yīng),呈色,β－內(nèi)酰胺類,NaOH,,H2NOH,,羥肟酸衍生物,,H+,Fe3+,,羥肟酸鐵

3、反應(yīng),,H+,,Fe3+/3,（紅、棕、褐）,（開環(huán)分解）,似肽鍵,雙縮脲反應(yīng) β-內(nèi)酰胺類,,,內(nèi)酰胺類,堿性酒石酸銅,¾,¾,¾,¾,¾,®,¾,-,b,堿性酒石酸銅反應(yīng),,藍紫,堿性酒石酸銅反應(yīng),,,,藍紫色,Β－內(nèi)酰胺類抗生素,,口服制劑,注射用粉針劑,,片劑、膠囊,顆粒劑、干混懸劑,,制 劑 分 類,按輔料不同,Β

4、－內(nèi)酰胺類抗生素,,片劑、膠囊,注射用粉針劑,輔料成分簡單、干擾小,,,制 劑 特 點,幾乎不含輔料或僅含少量助溶劑，如精氨酸、碳酸鈉,,顆粒劑干混懸劑,輔料含量多、成分復(fù)雜、干擾大,主藥含量少,,,輔料成分多,,,頭孢氨芐顆粒,【規(guī)格】0.125g 0.05g,香 精,色 素,,,嚴重干擾顏色反應(yīng)結(jié)果,★ β－內(nèi)酰胺類抗生素快 檢 系

5、統(tǒng) 方 法 分 類,按制劑中輔料的多少及種類分為三類：注射用粉針劑：幾乎不含輔料或僅含少量助溶劑，如精氨酸、碳酸鈉片劑、膠囊：輔料成分簡單、干擾小顆粒劑、干混懸劑：輔料含量多、成分復(fù)雜、干擾大,注射用粉針,,青霉素類,頭孢菌素類,,堿性酒石酸銅反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),,H-033,H-033,顏色反應(yīng)鑒別,薄層色譜系統(tǒng),,堿性酒石酸銅反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),,H-036,β－內(nèi)酰胺類抗生素的化學(xué)系統(tǒng)鑒別的總體思路,羥肟酸鐵反應(yīng),,

6、片劑,,,青霉素類,頭孢菌素類,,羥肟酸鐵反應(yīng),堿性酒石酸銅反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),,H-033,H-036,顏色反應(yīng)鑒別,薄層色譜系統(tǒng),,堿性酒石酸銅反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),,H-033,顆粒劑、干混懸劑,堿性酒石酸銅(1-5)反應(yīng),三氯化鐵反應(yīng),顏色反應(yīng)鑒別,薄層色譜系統(tǒng),H-034,,,,,羥肟酸鐵反應(yīng),β-內(nèi)酰胺類抗生素,青霉素類,頭孢類,注射用粉針,β－內(nèi)酰胺類抗生素的化學(xué)系統(tǒng)鑒別的

7、 具體方法與步驟,,堿性酒石酸銅反應(yīng),,,青霉素鈉氯唑西林鈉苯唑西林鈉,氨芐西林鈉/舒巴坦鈉阿莫西林鈉/克拉維酸鉀氨芐西林鈉氨芐西林鈉/氯唑西林鈉,阿莫西林鈉,美洛西林鈉,青霉素類,三氯化鐵反應(yīng),,氨芐西林鈉/舒巴坦鈉,阿莫西林鈉/克拉維酸鉀,,氨芐西 林鈉,,氨芐西林鈉/氯唑西林鈉,氨芐西林鈉/舒巴坦鈉阿莫西林/克拉維酸鉀氨芐西林鈉氨芐西林鈉/氯唑西林鈉,,TLC,,,

8、阿莫西林鈉/克拉維酸鉀,,,氨芐西林鈉/舒巴坦鈉,,氨芐西林鈉/舒巴坦鈉,阿莫西林鈉/克拉維酸鉀,,氯唑西林鈉苯唑西林鈉,三氯化鐵反應(yīng),1%醋酸反應(yīng),氯唑西林鈉,苯唑西林鈉,微桔紅色或淺桔紅色混濁或沉淀,有顆粒掛壁,,堿性酒石酸銅反應(yīng),頭孢他啶頭孢曲松鈉頭孢唑肟鈉頭孢拉定,頭孢唑林鈉頭孢噻吩鈉頭孢呋辛鈉頭孢哌酮鈉頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉,藍色變墨綠色溶液,墨綠色變棕黃色,美洛培南亞胺培南/西司他丁,頭

9、孢菌類,,,三氯化鐵反應(yīng),頭孢他啶頭孢曲松鈉,,TLC,,頭孢曲松鈉,,,,頭孢他啶,頭孢唑肟鈉,頭孢拉定,,頭孢唑林鈉頭孢噻吩鈉頭孢呋辛鈉頭孢哌酮鈉頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉,藍色變墨綠色溶液,三氯化鐵反應(yīng),頭孢唑林鈉頭孢噻吩鈉,,TLC,頭孢唑林鈉,,,,,頭孢噻吩鈉,頭孢呋辛鈉頭孢哌酮鈉頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉,H-033,,TLC,,,,,頭孢呋辛鈉,,頭孢哌酮鈉,,,,頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉,頭孢呋辛鈉

10、頭孢哌酮鈉頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉,H-033,,,,TLC,美洛培南,,,,亞胺培南/西司他丁,H-033,,美洛培南亞胺培南/西司他丁,三氯化鐵反應(yīng),片劑 膠囊,β-內(nèi)酰胺類抗生素,羥肟酸鐵反應(yīng),阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀氨芐西林青霉素V鉀,,頭孢拉定頭孢氨芐頭孢羥氨芐,頭孢呋辛酯鹽酸頭孢他美酯頭孢泊肟酯,頭孢克洛,,,阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀氨芐西林青霉素V鉀,堿性酒石酸銅反應(yīng),青霉素

11、V鉀,,阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀氨芐西林,三氯化鐵反應(yīng),氨芐西林,,TLC,,,,阿莫西林,,,阿莫西林,克拉維酸鉀,,,H-035,,阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀氨芐西林,頭孢拉定頭孢氨芐頭孢羥氨 芐,三氯化鐵反應(yīng),頭孢拉定頭孢氨芐,頭孢羥氨芐,,TLC,,,頭孢拉定,,,頭孢氨芐,,頭孢呋辛酯鹽酸頭孢他美酯頭孢泊肟酯,堿性酒石酸銅反應(yīng),頭孢呋辛酯,鹽酸頭孢他美酯,頭孢泊肟酯,

12、顆粒劑 干混懸劑,β-內(nèi)酰胺類抗生素,三氯化鐵反應(yīng),頭孢氨芐/甲氧芐啶頭孢拉定頭孢氨芐頭孢羥氨芐頭孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀頭孢克肟,,頭孢泊肟酯,頭孢地尼,頭孢氨芐/甲氧芐啶頭孢拉定頭孢氨芐頭孢羥氨芐頭孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀頭孢克肟,堿性酒石酸銅反應(yīng)（1→ 5）,頭孢氨芐/甲氧芐啶,頭孢氨芐頭孢拉定,頭孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀,頭孢克肟,深藍紫色,

13、,淺墨綠色,,頭孢羥氨芐,墨綠色,,深紅色,,深棕色,,,頭孢克洛阿莫西林阿莫西林/克拉維酸鉀,,TLC,頭孢克洛,,阿莫西林,,阿莫西林,,克拉維酸鉀,,H-034,操作要點及注意事項,顏 色 反 應(yīng),顏色反應(yīng)鑒別 一些品種（制劑）的羥肟酸鐵反應(yīng)和三氯化鐵反應(yīng)，反應(yīng)后溶液的顏色深淺及溶液狀態(tài)（澄清、渾濁、沉淀等）的判斷受實驗人員的主觀因素的影響較大。為便于判斷，標

14、準正文中采用以“或”連接幾種顏色、狀態(tài)的方法進行敘述，舉例如下：,,注射用粉針劑的羥肟酸鐵反應(yīng)：桔紅色、深桔紅色或淺桔紅色混濁或溶液，照片如下：,注射用粉針劑的三氯化鐵反應(yīng)：微桔紅色或淺桔紅色混濁或沉淀，照片如下：,顆粒劑、干混懸劑的三氯化鐵反應(yīng)：桔紅色、深桔紅色或淺桔紅色，照片如下：,,一些品種（制劑）的堿性酒石酸銅反應(yīng)，反應(yīng)現(xiàn)象是顏色漸變的過程，如“深葡萄紫色變深棕色”、“墨綠色變棕黃色”、“藍色變墨綠色”、“深葡萄紫色變深墨綠色”

15、等，且變化速度的快慢依品種各異。因此，操作該反應(yīng)時需仔細觀察現(xiàn)象。,樣品的溶解性對顏色結(jié)果的影響,注射用亞胺培南西司他丁加水溶解時，發(fā)現(xiàn)溶解性不好使供試品溶液出現(xiàn)混濁，但不影響反應(yīng)現(xiàn)象的觀察和結(jié)果的判斷．,輔料對顏色反應(yīng)結(jié)果的影響,由于注射劑輔料較少直接溶解即可，不需過濾；片劑和膠囊劑過濾與否對結(jié)果影響不大，本實驗仍以取粉末加溶劑溶解，取上清夜直接加入試劑后觀察顏色為主；顆粒劑干混懸劑用普通的過濾方法很難過濾，輔料對實驗結(jié)果會產(chǎn)生一定影

16、響，大部分顆粒劑仍以取粉末加溶劑溶解，取上清夜直接加入試劑后觀察顏色，參考快檢手冊的圖片仔細觀察顏色,薄 層 色 譜,操作要點及注意事項,操 作 要 點,選擇參比物的依據(jù),Rf值的計算,Rf值的計算應(yīng)以UV254nm下檢視的斑點位置為準（舒巴坦鈉以碘蒸氣熏蒸后的斑點位置計），注意從斑點前沿開始測量。,以Rf值結(jié)合相對Rf值定性的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性比單獨以Rf值定性高。,展開劑在展開過程

17、的揮發(fā)問題,由于本系列的展開劑中有乙醚和甲酸，揮發(fā)性較強，在展開過程中一定要注意圓形展開缸的密閉性，解決方案：在展開缸的蓋子與缸的接觸的地方要均勻涂布真空硅脂，且用夾子夾好．,注意事項,舒巴坦鈉UV254nm下檢視無斑點，經(jīng)碘蒸氣熏蒸后斑點顏色依然較淺，操作時需仔細觀察。,供試品溶液的制備：參照【取樣方法參照表】取本品一包，按標示量加入稀乙醇，振搖2～3分鐘，制成每1ml約含25mg阿莫西林的溶液，靜置，取上清液作為供試品溶液。,顆粒劑