人胚胎生殖細(xì)胞移植治療豬急性心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:1.建立豬急性心肌梗死模型:2.觀察人胚胎生殖細(xì)胞(human embryonicgerm cells,hEGCs)移植到豬急性心肌梗死模型心肌中的存活及分化；3.探討人EG細(xì)胞移植心肌組織后血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表達(dá)及意義。
　　 方法:取5-10周流產(chǎn)人胚胎生殖腺嵴,采用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人EG細(xì)胞。單獨(dú)培養(yǎng)人EG細(xì)胞,同時(shí)將人EG細(xì)胞與胚胎心

2、肌細(xì)胞共培養(yǎng)以模擬心肌微環(huán)境,分別檢測(cè)二者第3天與第9天培養(yǎng)上清液中VEGF的表達(dá)水平。通過結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支的方法建立豬急性心肌梗死(AMI)模型,分為移植組、對(duì)照組。移植組為將體外擴(kuò)增的人EG細(xì)胞注射到豬梗死心肌周邊,對(duì)照組用同樣方法注射無菌PBS。移植后2周處死豬,用免疫組織化學(xué)方法以鼠抗人細(xì)胞核抗體MAB1281作示蹤劑,檢測(cè)移植細(xì)胞的存活情況,并觀察轉(zhuǎn)錄因子GATA-4、連接蛋白Cx43在移植細(xì)胞的表達(dá)。
　　 結(jié)果

3、:體外培養(yǎng)獲得大量人EG細(xì)胞,人EG細(xì)胞與胚胎心肌細(xì)胞共培養(yǎng)組第3天與第9天上清液中VEGF含量分別較人EG細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)組高,差別有顯著意義(P<0.05)；成功建立豬急性心肌梗死模型,結(jié)扎冠脈后可見心電圖典型的心肌梗死變化；免疫組化顯示移植組抗人細(xì)胞核抗體MAB1281、轉(zhuǎn)錄因子GATA-4、連接蛋白Cx43均呈陽性表達(dá),對(duì)照組為陰性表達(dá)。
　　 結(jié)論:在豬急性心肌梗死模型建立后經(jīng)心外膜移植人EG細(xì)胞,人EG細(xì)胞在宿主心肌存活