農(nóng)桿菌介導(dǎo)的RSVIRBSDV雙抗基因共轉(zhuǎn)化水稻研究.pdf

1、水稻是我國最重要的糧食作物之一，其產(chǎn)量和品質(zhì)對于我國的糧食生產(chǎn)和糧食安全都至關(guān)重要。水稻條紋葉枯?。≧SV）和黑條矮縮病（RBSDV）為水稻主要的病毒病害，嚴(yán)重影響水稻的生產(chǎn)，因此培育抗病水稻新品種是水稻育種的重要目標(biāo)。另外，由于對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的爭議日趨激烈，研究開發(fā)去除標(biāo)記基因的轉(zhuǎn)化系統(tǒng)勢在必行，利用共轉(zhuǎn)化系統(tǒng)去除標(biāo)記基因具有簡便快捷的特點(diǎn)。
　　 本研究以晚粳97成熟胚作為起始材料，采用農(nóng)桿菌雙載體共轉(zhuǎn)化的方法，將編碼R

2、SV和RBSDV的雙抗CP基因的干涉載體與編碼潮霉素抗性基因（hpt）的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入水稻，獲得如下主要結(jié)果：
　　 1．皖粳97成熟胚在32℃光照條件下誘導(dǎo)愈傷的出愈率高達(dá)90.3％，且愈傷生長較快；
　　 2．選用次生愈傷組織更適合農(nóng)桿菌侵染，且在鋪有濾紙的共培養(yǎng)上23℃黑暗培養(yǎng)48h，可大大降低農(nóng)桿菌的污染機(jī)率，并可提高抗性愈傷率。
　　 3．抗性愈傷經(jīng)50mg/L的潮霉素篩選培養(yǎng)基篩選3周后，轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)，