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1、Orexin是一種通過其受體(OX1R和OX2R)發(fā)揮功能的神經(jīng)肽,被分為Orexin A和Orexin B兩種。研究發(fā)現(xiàn)Orexin的分布非常廣泛,參與調(diào)節(jié)多種生理功能,如對內(nèi)分泌、生殖活動的調(diào)控和調(diào)節(jié)攝食與能量平衡、以及對藥物成癮的影響等。
為了探索不同濃度Orexin A在不同時間對綿羊卵巢黃素化顆粒細胞中StAR、CYP11和3β-HSD(黃體功能相關(guān)基因)的影響,本實驗首先對綿羊卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)使其轉(zhuǎn)變成黃素化顆
2、粒細胞,即對顆粒細胞添加LH(2.5IU/ml)、FSH(2.5IU/ml)、E2(1μg/ mL)后培養(yǎng)24h。而后再對該黃素化顆粒細胞添加不同劑量(0.05,0.2,0.5和1μg/mL) Orexin A,分別于刺激后0、2、6、12 h和24h提取細胞總RNA,運用qPCR方法檢測了Bax/Bcl-2、OX1R以及黃體化相關(guān)基因CYP11、3β-HSD、StAR mRNA表達量的變化。結(jié)果顯示,添加Orexin A后,與對照組相
3、比,Bax/Bcl-2的值顯著升高,說明Orexin A可以促進黃素化顆粒細胞凋亡;與對照組相比,2h時1μg/ml Orexin A和12h時0.2μ g/ml濃度組均上調(diào)OX1R mRNA的表達;另外與對照組相比,1μg/ml濃度組在2h時StAR、CYP11和3β-HSD mRNA表達量都顯著下降,且0.2μg/ml濃度組在12h時StAR和3β-HSD mRNA表達量顯著下降,CYP11無顯著性變化。這說明1μg/ml和0.2μ
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