金絲桃苷、淫羊藿苷對大鼠卵巢顆粒細胞CYP17、CYP19表達影響的研究.pdf

1、目的:研究中藥單體金絲桃苷、淫羊藿苷是否促進大鼠卵巢顆粒細胞增殖并促進其分泌孕酮和雌二醇，同時，研究金絲桃苷、淫羊藿苷對顆粒細胞中雌二醇、孕酮合成的關(guān)鍵酶基因CYP17、CYP19的調(diào)控，以期闡明金絲桃苷、淫羊藿苷調(diào)控大鼠卵巢顆粒細胞功能的機制。
　　方法:分離大鼠卵巢顆粒細胞，體外培養(yǎng)24h后于培養(yǎng)基中加入不同濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷，繼續(xù)培養(yǎng)72h，通過MTT法檢測實驗組及對照組卵巢顆粒細胞增殖率，繪制大鼠卵巢顆粒細胞生長曲線

2、;酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測各組顆粒細胞培養(yǎng)液中的雌二醇、孕酮濃度，熒光實時定量PCR法檢測各組卵巢顆粒細胞CYP17、CYP19基因mRNA的表達水平;蛋白免疫印跡法檢測各組CYP17、CYP19蛋白的表達。
　　結(jié)果:一定濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷可明顯增加卵巢顆粒細胞數(shù)量(P＜0.05)，并促進其雌二醇、孕酮的分泌(P＜0.05)，同時促進CYP17、CYP19基因mRNA的表達(P＜0.05)。50ug/L為金絲桃苷促進CYP1

3、7(P＜0.01)、CYP19(P＜0.01)表達的最佳濃度;10ug/L為淫羊藿苷促進CYP17(P＜0.05)、CYP19(P＜0.01)表達的最佳濃度。蛋白免疫印跡法的結(jié)果與mRNA相一致。
　　結(jié)論:一定濃度的金絲桃苷、淫羊藿苷能夠促進體外培養(yǎng)的大鼠卵巢顆粒細胞增殖，并促進卵巢顆粒細胞分泌雌二醇及孕酮，同時促進CYP17、CYP19 mRNA及的蛋白表達，說明金絲桃苷、淫羊藿苷促進顆粒細胞增殖，并促進CYP17、CYP19