ADAM基因在卵巢顆粒細(xì)胞中的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(heparin-binding epidermal growth factor-like growthfactor，HB-EGF)是表皮生長(zhǎng)因子家族的新成員。在細(xì)胞中，首先合成的是其前體，鑲嵌于細(xì)胞膜上，故稱膜結(jié)合型HB-EGF(proHB-EGF)。之后，在特異性去整合素-金屬蛋白酶(a disintegrin and metalloprotease，ADAM)的作用下，proHB-EGF

2、的細(xì)胞外域(ectodomain)被切下，脫落成為可溶性的成熟體，即溶解型HB-EGF(sHB-EGF)。sHB-EGF是多種細(xì)胞的分裂原，促進(jìn)細(xì)胞增殖。proHB-EGF也具有生物活性，主要為抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)凋亡。ADAM蛋白是一類錨定于細(xì)胞膜的細(xì)胞表面蛋白家族，ADAM蛋白可能在細(xì)胞外基質(zhì)的水解、細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-基質(zhì)的粘連、細(xì)胞融合及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等細(xì)胞活動(dòng)中具有重要作用，廣泛參與各種正常的生理活動(dòng)。在人體，有21種ADAM亞型被發(fā)現(xiàn)

3、，它們的表達(dá)存在顯著的組織特異性：其中ADAM2、7、18、19、20、21、30在睪丸特異表達(dá)，ADAM8、28在造血細(xì)胞特異表達(dá)，本實(shí)驗(yàn)在剩余的ADAM亞型(ADAM9、10、11、12、15、17、19、22、23、32、33、ADAMDEC1)中篩選黃體發(fā)育和消退過程中特異性水解膜結(jié)合型HB-EGF的ADAM亞型，為人工干預(yù)黃體的發(fā)育與消退提供新的靶點(diǎn)。
　　 方法：
　　 取行體外受精-胚胎移植患者的黃素化顆粒

4、細(xì)胞，提取顆粒細(xì)胞RNA，用Primer 5.0軟件設(shè)計(jì)各亞型的引物，再用RT-PCR的方法篩選ADAM亞型在顆粒細(xì)胞中的表達(dá)情況，并通過測(cè)序方法進(jìn)一步驗(yàn)證。
　　 結(jié)果：
　　 RT-PCR方法檢測(cè)證實(shí)ADAM9和ADAM17在卵巢顆粒細(xì)胞中有表達(dá)，并且通過測(cè)序得到了進(jìn)一步的證實(shí)。
　　 結(jié)論：
　　 卵巢顆粒細(xì)胞中ADAM基因的表達(dá)亞型為ADAM9和ADAM17，推測(cè)ADAM9和/或ADAM17可能為