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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究不同濃度雄激素對(duì)體外培養(yǎng)的人黃素化顆粒細(xì)胞中PTEN表達(dá)的影響,探討雄激素引起顆粒細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制,為多囊卵巢綜合征的發(fā)病機(jī)制提供新的研究思路。
方法:
收集2011年11月-12月中南大學(xué)湘雅醫(yī)院婦產(chǎn)科生殖中心經(jīng)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射(ICSI)治療的患者卵巢黃素化顆粒細(xì)胞,體外培養(yǎng)48小時(shí)后分別加入不含血清的的不同濃度的睪酮培養(yǎng)基分成四組,空
2、白對(duì)照組、10-7M組,10-6M組,10-5M組,繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí),用RT-PCR法檢測(cè)顆粒細(xì)胞中PTENmRNA的表達(dá),DAPI染色法檢測(cè)顆粒細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:
1、人黃素化顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)24小時(shí)后貼壁生長(zhǎng),48小時(shí)后細(xì)胞增殖顯著,胞漿內(nèi)含豐富的顆粒狀物質(zhì),胞漿飽滿,張力明顯,細(xì)胞伸出細(xì)長(zhǎng)偽足,細(xì)胞與細(xì)胞之間通過偽足緊密連接,呈典型顆粒細(xì)胞樣特征,適宜行體外實(shí)驗(yàn)。
2、體外培養(yǎng)人黃素化
3、顆粒細(xì)胞中添加10-5M濃度的睪酮培養(yǎng)24小時(shí)后能促進(jìn)顆粒細(xì)胞中PTEN的mRNA的表達(dá),與10-7M組、10-6M組及空白對(duì)照組比較差異均有顯著性(P<0.05),10-7M組與10-6M組與空白對(duì)照組比較差異均無顯著性(P>0.05);
3、體外培養(yǎng)人黃素化顆粒細(xì)胞中添加10-5M濃度睪酮培養(yǎng)24小時(shí)后檢查發(fā)現(xiàn)顆粒細(xì)胞凋亡指數(shù)為6.29±1.78%,與10-7M組、10-6M組及空白對(duì)照組比較差異均有顯著性(P<0.0
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