基于HAND系統(tǒng)的腹瀉病原體多重PCR檢測方法的建立和應(yīng)用研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文基于HAND系統(tǒng)的腹瀉病原體多重PCR檢測方法的建立和應(yīng)用研究EstablishmentandapplicationofHANDsystem—basedmultiplexPCRassaysforthedetectionofdiarrheapathogens課題來源：國家傳染病科技重大專項一“傳染病監(jiān)測技術(shù)平臺”子項目(2009ZXl060202)珠海檢驗檢疫局科技計劃項目(ZH20094)、(ZH201

2、31)學(xué)位申請人滕勇勇導(dǎo)師姓名阿蚓副教授、莫秋華副主任技師專業(yè)名稱流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)培養(yǎng)類型專業(yè)型培養(yǎng)層次碩士研究生所在學(xué)院公共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)院答辯委員會主席陳維清教授答辯委員會委員柯昌文主任技師曾年華研究員陳青山教授陳清教授2014年5月28日廣州碩士學(xué)位論文基于HAND系統(tǒng)的腹瀉病原體多重PCR檢測方法的建立和應(yīng)用研究碩士研究生：滕勇勇指導(dǎo)教師：匭鲴副教授莫秋華副主任技師摘要研究背景和目的急性感染性腹瀉(簡稱腹瀉)一直是危害人類健

3、康特別是嬰幼兒健康的常見病和多發(fā)病，是全球范圍內(nèi)影響兒童和成人的重要公共衛(wèi)生問題。引起腹瀉的病原體主要是病毒和細(xì)菌，但具體種類繁多，且常常伴有多種腹瀉病原體復(fù)合感染的情況，在實際檢測中往往需要從這一系列的懷疑對象中確定腹瀉病原體，為腹瀉病的快速診斷帶來了極大的困擾。因此，建立一種高通量、高效的腹瀉病原體快速檢測技術(shù)對于診斷、控制和及時治療腹瀉病具有重要意義。然而，國內(nèi)外對腹瀉病原體實驗室檢測還很大程度依賴傳統(tǒng)分離培養(yǎng)和生化鑒定，但是分離

4、培養(yǎng)和生化鑒定敏感性低、費時費力，需要一周左右才能完成，難以達(dá)到暴發(fā)流行時快速檢測的要求，而且有的病原體(如諾如病毒)目前還沒有合適的細(xì)胞體系和動物模型進(jìn)行培養(yǎng)。一些免疫學(xué)方法(如酶聯(lián)免疫吸附試驗)也被廣泛的應(yīng)用到腹瀉病原體的檢測，但其敏感性低，假陰性率高，容易造成漏檢，而且對于細(xì)菌來說需要預(yù)先將樣本中的目標(biāo)菌進(jìn)行濃縮和純化，短時間內(nèi)也很難得到結(jié)果，難以達(dá)到快速檢測的要求。隨著分子生物學(xué)檢測方法的發(fā)展，基于腹瀉病原體的分子生物學(xué)診斷技術(shù)