探討miRNA在家雞性別分化中的作用.pdf

1、近年來許多起調控作用的小分子RNA被發(fā)現，真核生物的基因表達中，miRNA起著非常關鍵的調控作用．在胚胎發(fā)生過程中，許多參與組織特異性的miRNA功能已被證明，但關于miRNA在胚胎性別分化階段作用的研究尚未見報道。雞胚作為研究脊椎動物胚胎發(fā)育生物學經典的模型，運用已有幾十年的歷史。但相比其它的脊椎動物，對于家雞中的miRNA數量、種類和表達譜我們仍知之甚少，尤其是胚胎期的性別分化階段。 本研究通過對性別分化前后時期家雞胚胎樣品

2、(4天齡雌、雄和7天齡雌、雄)的小RNA純化，反轉錄PCR擴增建立cDNA文庫，利用Solexa/ Illumina高通量測序方法對其測序，根據目前已公布的miRNA注釋信息對所得小RNA序列注釋分類，并從已知miRNA及其前體的序列的保守性和結構特點，以生物信息學方法從中篩選、甄別可信度高的miRNA。隨后我們統(tǒng)計miRNA的表達量，構建表達譜并進行顯著差異表達分析。最終得到miR-148a，h005-5p，h014-5p，miR—2