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文檔簡介
1、本研究從關中奶山羊中克隆得到催乳素基因，并以已有的人t-PA乳腺特異性表達載體pEBT為基礎，成功的構建了催乳素和t-PA基因乳腺共表達載體pPT。轉染鼠乳腺癌細胞EMT6，篩選獲得陽性表達株。本實驗驗證了催乳素對提高外源蛋白的表達有促進作用并為利用體細胞核移植技術生產牛乳腺生物反應器，提供了高效的乳腺表達載體，對于提高乳腺生物反應器中外源蛋白表達量的研究進行了新的探索。相關研究結果如下： 1.通過RT-PCR技術成功的從關中奶
2、山羊中克隆得到長度為760bp催乳素cDNA基因，其中包含完整的編碼序列。序列分析表明，片段與GenBank中登錄的羊PRLcDNA序列的同源性為99％，且突變不影響蛋白的結構和功能。 2.利用定向克隆的方法將PRLcDNA基因克隆至已有的人t-PA乳腺特異性表達載體pEBT，構建成催乳素和t-PA基因乳腺共表達載體pPT。載體含有抗性基因和綠色熒光蛋白(EGFP)報告基因，并報告基因和目的基因表達為融合型表達。 3.通
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