壇紫菜品質(zhì)測(cè)定條件的優(yōu)化及新品系品質(zhì)分析.pdf

1、本文通過(guò)對(duì)壇紫菜主要品質(zhì)指標(biāo)（藻膽蛋白、葉綠素 a、粗蛋白、總氨基酸、游離氨基酸）的測(cè)定條件進(jìn)行優(yōu)化，獲得了準(zhǔn)確科學(xué)的壇紫菜品質(zhì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)方法。并以此方法對(duì)通過(guò)雜交和選育獲得的六個(gè)壇紫菜新品系[速長(zhǎng)型新品系（Z-17）、優(yōu)質(zhì)型新品系（Q-1）、耐高溫型新品系（Z-26）、薄葉型新品系（Z-61）、耐低氮磷型新品系（9號(hào)Ⅳ）和耐低鹽型新品系（8號(hào)1）]的不同子代及對(duì)照組的品質(zhì)性狀進(jìn)行分析，為應(yīng)用品質(zhì)分析技術(shù)進(jìn)行壇紫菜的種質(zhì)改良和高品質(zhì)壇紫菜

2、新品種的選育奠定了基礎(chǔ)。通過(guò)SDS電泳技術(shù)對(duì)新品系壇紫菜的蛋白質(zhì)組成進(jìn)行分析，為進(jìn)一步在蛋白質(zhì)水平進(jìn)行壇紫菜種質(zhì)改良與鑒定探索新的途徑。
　　1、新品系測(cè)定條件的優(yōu)化：用正交實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法對(duì)壇紫菜的品質(zhì)測(cè)定條件進(jìn)行優(yōu)化分析。結(jié)果如下：藻膽蛋白提取時(shí)細(xì)胞破壁方式為研磨與反復(fù)凍融并用，提取液為0.05mol/L的磷酸鹽緩沖液，提取過(guò)程中避免光照，提取所用藻體質(zhì)量為0.010g，提取液經(jīng)過(guò)6次反復(fù)凍融后進(jìn)行測(cè)定。葉綠素a提取時(shí)細(xì)胞破壁方式

3、為研磨，提取過(guò)程中避免光照，提取所用藻體質(zhì)量為0.010g。粗蛋白測(cè)定時(shí)最佳藻體用量為0.150g，硫酸用量為10ml?？偘被崽崛〉淖罴言弩w用量為0.050g，提取液在60℃干燥箱中干燥，超純水稀釋3倍后上機(jī)分析。游離氨基酸提取的最佳藻體用量為0.010g，采用去離子水作為提取液，在60℃恒溫條件下提取4h。
　　2、速長(zhǎng)型新品系（Z-17）的品質(zhì)性狀：4個(gè)子代葉狀體的藻膽蛋白含量差異不顯著，且均顯著高于對(duì)照組的（68.01±3

4、.33）mg/g，其中藻膽蛋白含量最高為 F4的（123.35±3.69）mg/g，達(dá)到對(duì)照組藻膽蛋白含量的1.81倍；葉綠素 a的含量均顯著高于對(duì)照組，其中F2葉狀體葉綠素a的含量最高，可達(dá)（9.78±0.03）mg/g，顯著高于對(duì)照組葉綠素a的含量（(6.60±0.36)mg/g），比對(duì)照組高出48.18％；粗蛋白含量與對(duì)照組差異顯著，其中F1葉狀體的粗蛋白含量最高為（444.95±6.44）mg/g，比對(duì)照組高35.71%；總氨基

5、酸含量均顯著高于對(duì)照組，且富含人體必需氨基酸，特別是纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸等必需氨基酸含量豐富；游離氨基酸總量與對(duì)照組差異不顯著，但其中丙氨酸的含量顯著高于對(duì)照組，如F4葉狀體中丙氨酸的含量為10.93mg/g，達(dá)到對(duì)照組的2.24倍。
　　3、優(yōu)質(zhì)型新品系（Q-1）的品質(zhì)性狀：4個(gè)子代葉狀體藻膽蛋白和葉綠素a的含量均顯著高于對(duì)照組，其中F4葉狀體藻膽蛋白和葉綠素a的含量最高，分別達(dá)到（120.06±1.84） mg/g和(10.

6、39±0.08)mg/g，4個(gè)子代及對(duì)照組的藻膽蛋白和葉綠素 a的含量成正相關(guān)變化。粗蛋白含量均顯著高于對(duì)照組，其中F4葉狀體最高可達(dá)（444.72±5.30）mg/g，比對(duì)照組高35.6％；總氨基酸含量均高于對(duì)照組，F(xiàn)4葉狀體總氨基酸總量為（385.31±5.22） mg/g，顯著高于對(duì)照組的（288.62±5.73）mg/g，比對(duì)照組高33.5%；游離氨基酸中四種呈味氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸和甘氨酸）含量顯著高于對(duì)照組。

7、r>　　4、薄葉型新品系（Z-61）的品質(zhì)性狀：4個(gè)子代葉狀體在未剪收和第一次剪收時(shí)的藻膽蛋白和葉綠素a含量均顯著高于對(duì)照組的含量；同一子代粗蛋白含量變化為第一次剪收﹥未剪收﹥第二次剪收，且第一次剪收與未剪收時(shí)差別不大，各個(gè)子代葉狀體第一次剪收及未剪收時(shí)粗蛋白的含量均顯著的高于對(duì)照組；4個(gè)子代葉狀體在未剪收和第一次剪收時(shí)的總氨基酸和游離氨基酸含量顯著高于第二次剪收時(shí)的含量，且呈味氨基酸含量豐富。
　　5、耐高溫型新品系（Z-26）

8、的品質(zhì)性狀：各個(gè)子代葉狀體的藻膽蛋白和葉綠素 a含量均顯著的高于對(duì)照組，其中 F4葉狀體的藻膽蛋白含量最高是（142.29±2.75）mg/g,為對(duì)照組的2.09倍，葉綠素a含量也較高，達(dá)到（10.51±0.89）mg/g；粗蛋白含量高于或者顯著高于對(duì)照組；總氨基酸含量顯著高于對(duì)照組，富含人體必需的氨基酸，特別是纈氨酸、亮氨酸、賴氨酸含量豐富，均高于對(duì)照組；游離氨基酸總量顯著高于對(duì)照組，呈味氨基酸中的天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸含量豐富。在

9、耐高溫實(shí)驗(yàn)中，各項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)在10d的高溫26℃實(shí)驗(yàn)組和正常21℃實(shí)驗(yàn)組中呈波動(dòng)變化，而在高溫30℃實(shí)驗(yàn)組中呈遞減變化。
　　6、耐低氮磷型新品系（9號(hào)Ⅳ）的品質(zhì)性狀：5項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)（藻膽蛋白、葉綠素a、粗蛋白、總氨基酸、游離氨基酸）隨著低氮磷培養(yǎng)天數(shù)的增加均呈遞減趨勢(shì)，且經(jīng)過(guò)低氮磷培養(yǎng)和未經(jīng)過(guò)低氮磷培養(yǎng)的藻體品質(zhì)指標(biāo)有顯著性差異，低氮磷培養(yǎng)10d的藻體5項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)分別降至正常藻體的32.50%、24.79%、37.72%、40.80

10、%、26.28%。
　　7、耐低鹽型新品系（8號(hào)1）的品質(zhì)性狀：F3葉狀體的藻膽蛋白含量較F1、F2高，其中在正常鹽度條件藻體的藻膽蛋白含量最高，為（86.41±0.60）mg/g，略高于在低鹽條件下藻體的藻膽蛋白含量；在鹽度為10的低鹽培養(yǎng)液中培養(yǎng)藻體葉綠素 a含量最高，為（7.52±0.24）mg/g；在正常鹽度條件下培養(yǎng)的F1和F3葉狀體粗蛋白含量略高于在低鹽條件下藻體的粗蛋白含量，其中在正常鹽度條件下培養(yǎng)的F3葉狀體的粗蛋

11、白含量最高，為（390.63±8.53）mg/g；F3葉狀體在正常鹽度培養(yǎng)的藻體總氨基酸含量最高，達(dá)到（317.88±16.74）mg/g，鹽度越低，藻體的總氨基酸含量越低；在正常鹽度條件下培養(yǎng)的藻體游離氨基酸含量較高，達(dá)到（24.90±0.57）mg/g，略高于對(duì)照組的游離氨基酸含量。
　　8、壇紫菜SDS電泳分析：7個(gè)壇紫菜樣品共分離出6條明顯的共有條帶，其中16-20KDa處是一條很粗的條帶，其余5個(gè)條帶分子量大小依次為：5