雞和鵪鶉屬間雜交種睪丸發(fā)育不良機(jī)制的初步探索.pdf

1、雞與鵪鶉雜交種是禽類中比較典型的遠(yuǎn)緣雜交成功的實例，但其雜交的受精率和孵化率都很低，雜交種出殼后睪丸發(fā)育不良且不育，因此,目前尚不能應(yīng)用于生產(chǎn)。睪丸是雄性動物的主要生殖器官和精子生成的場所，同時也是合成和分泌某些激素的場所，對維持雄性動物的正常生理和生育起著重要的作用。睪丸的生長發(fā)育受多種因素的影響，其中AR、ER基因作為雄、雌激素受體對睪丸的發(fā)育可能起著一定的影響作用。睪丸的發(fā)育過程又是一個細(xì)胞增值和凋亡的動態(tài)過程，而Bcl-2和PC

2、NA 是與細(xì)胞凋亡和增值相關(guān)的基因。本研究采用熒光定量PCR 對睪丸AR、ER、PCNA和Bcl-2等基因表達(dá)水平的發(fā)育性變化進(jìn)行了比較研究，同時結(jié)合組織學(xué)方法分析了雞與鵪鶉及其雜交種睪丸形態(tài)的物種間差異，以探索雞與鵪鶉屬間雜交種睪丸發(fā)育不良的相關(guān)機(jī)理。
　　 一、雞、鵪鶉及其雜交種睪丸形態(tài)結(jié)構(gòu)差異應(yīng)用解剖學(xué)和組織學(xué)方法對成年雞、鵪鶉及其雜交種的睪丸形態(tài)學(xué)進(jìn)行比較研究。結(jié)果表明:(1)雜交種睪丸成乳酪色，右側(cè)位置高于左側(cè)，左側(cè)略

3、大于右側(cè)，其上無血管，睪丸內(nèi)側(cè)面未見附睪，體積及重量明顯小于雞和鵪鶉的睪丸。(2)雜交種的曲細(xì)精管直徑，生精上皮高度和曲細(xì)精管體積密度均遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于雞和鵪鶉,而且雜交種生精細(xì)胞，支持細(xì)胞的數(shù)量均比雞和鵪鶉少。
　　 二、雞、鵪鶉及其雜交種睪丸中AR、ER的表達(dá)差異及發(fā)育性變化(1)雞與鵪鶉睪丸中AR mRNA表達(dá)變化模式相似，即呈先升高后下降趨勢。而雜交種睪丸中AR mRNA表達(dá)變化模式則有所不同呈逐漸下降趨勢。推測雜交種睪丸中AR

4、基因表達(dá)可能異常。
　　 (2)雞、鵪鶉及雜交種睪丸中ER基因表達(dá)發(fā)育模式各不相同，因此推測出ER基因的表達(dá)存在著物種差異。
　　 三、雞、鵪鶉及其雜交種睪丸中Bcl-2基因表達(dá)差異及發(fā)育性變化雞睪丸組織中Bcl-2 mRNA表達(dá)量在20～30日齡時逐漸升高，50日齡時有所下降，50～90日齡逐漸升高并達(dá)到峰值，120日齡顯著下降(P<0.05)并達(dá)到最低值。鵪鶉睪丸組織中Bcl-2 mRNA表達(dá)量在9～40日齡時逐漸下

5、降并達(dá)到低谷，之后迅速回升并維持在較高水平。雜交種睪丸組織中Bcl-2 mRNA表達(dá)量在10～90日齡時基本上沒有變化。提示Bcl-2基因在調(diào)控雜交種睪丸中細(xì)胞凋亡的模式不同于雞和鵪鶉。
　　 四、雞、鵪鶉及其雜交種睪丸中PCNA基因表達(dá)差異及發(fā)育性變化雞和鵪鶉睪丸組織中PCNA基因表達(dá)的發(fā)育性變化模式基本相似，均呈先下降然后極顯著(P<0.01)升高并達(dá)到峰值，之后又逐漸下降的趨勢，說明PCNA在雞和鵪鶉睪丸的正常發(fā)育過中可能