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文檔簡(jiǎn)介
1、雞(♂)與鵪鶉(♀)間的屬間雜交(以下簡(jiǎn)稱雞與鵪鶉雜交)是一種典型的遠(yuǎn)緣雜交,雜交種的肉品質(zhì)和生產(chǎn)性能等具有顯著的雜種優(yōu)勢(shì),但與其他物種遠(yuǎn)緣雜交(如馬和驢的雜交)相同,仍然具有雜種不育和受精率低下等雜交不親和性的問題。目前雞與鵪鶉雜交的平均受精率為4%-11%之間,最高僅為40%,因此,還不能在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。
本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)雞與鵪鶉屬間雜交母本個(gè)體的受精率檢測(cè),將區(qū)分出的高、低受精率個(gè)體進(jìn)行分組飼養(yǎng),用同一父本公鵪鶉分別與高、
2、低受精率組母鵪鶉交配并產(chǎn)生后代,對(duì)后代中的雌性個(gè)體進(jìn)行飼育及雜交實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其受精率,從而驗(yàn)證雜交母本個(gè)體的受精率差異是否具有遺傳性。進(jìn)而采用PCR-SSCP實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)高、低受精率組母鵪鶉個(gè)體進(jìn)行VEGF、CFTR基因多態(tài)性分析。旨在尋找影響雞與鵪鶉屬間雜交存在的受精率差異的分子標(biāo)記,為雞與鵪鶉屬間雜交受精率遺傳機(jī)理的研究奠定基礎(chǔ)。
(1)采用人工授精技術(shù)進(jìn)行雞與鵪鶉雜交實(shí)驗(yàn),共收集雜交種蛋3836枚并進(jìn)行孵化,經(jīng)檢測(cè)平均受精率為
3、21.06%,活胚率為7.02%。個(gè)體受精率最高可達(dá)87.5%,個(gè)體活胚率最高達(dá)40.63%。最低的為0,表明母本鵪鶉個(gè)體間的受精率存在著極顯著的差異。在此基礎(chǔ)上,選擇高受精率(受精率大于40%)和低受精率(受精率小于5%)的母本鵪鶉與同一只公鵪鶉進(jìn)行純繁,所獲得的子代母鵪鶉再與雞進(jìn)行屬間雜交以檢測(cè)親本母鵪鶉的受精率是否具有遺傳性,但兩組子代母鵪鶉的受精率差異不顯著,推測(cè)母本鵪鶉的受精率可能不具有遺傳性。
(2)采用PCR-S
4、SCP方法對(duì)高、低受精率組母鵪鶉個(gè)體間進(jìn)行VEGF、CFTR基因多態(tài)性分析,依據(jù)雞與鵪鶉間同源性設(shè)計(jì)18對(duì)引物,其中在鵪鶉基因上有9對(duì)引物擴(kuò)增出對(duì)應(yīng)的特異性片段,引物擴(kuò)增概率達(dá)50%,CFTR9外顯子發(fā)生4處單堿基堿基突變。經(jīng)χ2檢驗(yàn)(p<0.05),CFTR9的AA基因型在三個(gè)受精率組別中具有顯著差異,AA基因型出現(xiàn)頻率遠(yuǎn)高于其他兩種基因型。表明CFTR9的AA基因型可作為選擇高受精率母本鵪鶉的分子標(biāo)記,為提高雞與鵪鶉屬間雜交受精率的
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