兩個小麥ERF類轉(zhuǎn)錄因子基因的表達分析及作物ERF類轉(zhuǎn)錄因子的電子克隆.pdf

1、植物在受到外界環(huán)境刺激時，其自身會引發(fā)一個復雜的應答系統(tǒng)。明確植物抗逆、抗病應答的機制對提高農(nóng)作物的產(chǎn)量是十分重要的。ERF類轉(zhuǎn)錄因子屬于AP2/ERF轉(zhuǎn)錄因子家族的一個亞族，并僅存在于植物中。眾所周知，ERF類轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)控植物生長發(fā)育和逆境應答。因此，對轉(zhuǎn)錄因子的生物學功能的研究對于提高植物對環(huán)境刺激的耐受性具有重要的意義。
　　ERF類轉(zhuǎn)錄因子TaERF4、TaERF5是從小麥中克隆獲得。序列分析顯示，TaERF4、TaE

2、RF5的編碼氨基酸分別為246、243個，包括保守的位于N端的AP2/ERF結(jié)構(gòu)域和C端的EAR-motif；將不同植物的ERF類轉(zhuǎn)錄因子與TaERF4、TaERF5進行氨基酸序列比對，并進行聚類分析顯示，TaERF4、TaERF5屬于AP2/ERF家族中的ERF亞族。利用半定量RT-PCR對其進行表達特征分析顯示，TaERF4不僅可以被脫落酸、茉莉酸甲酯、乙烯和水楊酸信號分子誘導表達，還可以被傷害和病原菌CYR32的侵染所誘導，但是在

3、干旱處理下，TaERF4的表達受到抑制。TaERF5的表達被脫落酸、茉莉酸甲酯、水楊酸、干旱、傷害和病原菌CYR32的侵染所誘導，但在乙烯的處理下表達量無明顯變化。通過對TaERF4、TaERF5的表達譜分析表明，TaERF4、TaERF5轉(zhuǎn)錄因子可能即參與小麥對非生物脅迫的應答又參與小麥對生物脅迫的應答。
　　本研究以TaERF4、TaERF5為目的基因，運用農(nóng)桿菌介導的遺傳轉(zhuǎn)化，使其在煙草中超量表達，來進一步確定其在植物逆境應

4、答過程中的作用。目前，已經(jīng)獲得TaERF4轉(zhuǎn)基因抗性株系4株，TaERF5轉(zhuǎn)基因抗性株系5株。我們將使用這些株系來進一步對TaERF4、TaERF5的生物學功能進行探究。
　　本研究以 NCBI的EST數(shù)據(jù)庫為基礎，運用電子克隆的方法獲得一條大麥ERF類轉(zhuǎn)錄因子的cDNA序列和兩條高粱ERF類轉(zhuǎn)錄因子cDNA序列，命名為HvERFL1、SbERFL1和SbERFL2。它們都包含完整的開放閱讀框和AP2/ERF保守結(jié)構(gòu)域。我們運用一