新農(nóng)1號狗牙根再生體系建立及體細(xì)胞誘變研究.pdf

1、狗牙根(Cynodon dactylon)是一種具有重要經(jīng)濟(jì)價值,但組織培養(yǎng)難度較大的物種之一,其主要的瓶頸在于胚性愈傷組織的獲得及胚性維持比較困難,目前成功的報道多集中在以未成熟花序為外植體,而以穎果為外植體的成功報道較少。因此本研究以新農(nóng)1號狗牙根成熟穎果為外植體,探討激素種類、外源添加物對狗牙根胚性愈傷組織的誘導(dǎo)、繼代及分化的影響,建立高效再生體系。并以此為基礎(chǔ),對愈傷組織的胚性維持,以及60Co-γ射線輻射處理胚性愈傷組織進(jìn)行研

2、究。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴在愈傷組織誘導(dǎo)過程中,新農(nóng)1號狗牙根較適宜的培養(yǎng)基為添加2,4-D2.0mg/L、6-BA0.01mg/L、脯氨酸500mg/L的MS培養(yǎng)基,出愈率可達(dá)71.2％,愈傷形態(tài)為半透明水漬狀且淡黃色顆粒較多;繼代改造培養(yǎng)基為添加2,4-D0.5mg/L+6-BA0.5mg/L+ABA2.0mg/L+GSH2.0mg/L的MS培養(yǎng)基,培養(yǎng)4周后,愈傷組織增殖率可達(dá)41.3%,愈傷呈淡黃色顆粒狀;分化過程中

3、,在不添加任何激素的1/2MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)10天后,將帶有綠點的愈傷組織轉(zhuǎn)入添加6-BA1.0mg/L的MS培養(yǎng)基中,很快綠點變密,繼而分化成苗,愈傷組織再生頻率達(dá)25%,小植株形成的強度為16.7%。⑵在胚性維持實驗中,最佳的培養(yǎng)基組合為:添加蔗糖30g/L、瓊脂8g/L、2,4-D2.0mg/L、6-BA1.0mg/L、CuSO42.5mg/L、脯氨酸5.0mg/L的MS培養(yǎng)基。在此培養(yǎng)基中,胚性維持狀況良好,愈傷組織呈致密的淡黃色