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文檔簡(jiǎn)介
1、A亞群禽白血病病毒(ALV-A)是一種主要感染家禽的反轉(zhuǎn)錄病毒,可引起免疫抑制、淋巴腫瘤、血管瘤甚至死亡等。ALV-A自然宿主是雞,血清學(xué)調(diào)查表明ALV-A在我國(guó)雞群中感染率高達(dá)47.9%;近年來(lái),一些報(bào)道顯示在我國(guó)非自然死亡的野生鳥(niǎo)類中也分離到ALV-A,這說(shuō)明鳥(niǎo)類可能作為ALV-A潛在的感染宿主。至今,有關(guān)ALV-A對(duì)鳥(niǎo)類的致病性尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究使用肉種雞分離的ALV-A毒株對(duì)成年雞、鵪鶉和鴿子進(jìn)行致病性觀察,利用制備的gp85蛋
2、白疫苗對(duì)雞和鵪鶉進(jìn)行免疫接種試驗(yàn),評(píng)價(jià)了免疫保護(hù)效果,為理解外源性ALV在不同鳥(niǎo)類流行中的科學(xué)意義和建立禽白血病科學(xué)防控措施提供依據(jù)。
本研究首先對(duì)送檢的山東濰坊黑土雞腫瘤組織樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序,單抗介導(dǎo)的IFA檢測(cè),并通過(guò)體外病毒增殖分離獲得病毒毒株,對(duì)病毒進(jìn)行全基因測(cè)序,利用生物信息軟件分析其進(jìn)化關(guān)系。使用早期分離的ALV-A-SDAU09C1毒株,設(shè)計(jì)不同感染劑量對(duì)幼齡鵪鶉和高劑量對(duì)成年雞、鵪鶉和鴿子進(jìn)行致病性觀察
3、。利用制備的ALV-A亞單位疫苗對(duì)種雞和鵪鶉分別進(jìn)行免疫接種,收集種蛋,對(duì)孵化的鵪鶉和雛雞進(jìn)行攻毒試驗(yàn),評(píng)價(jià)了免疫保護(hù)效果。
結(jié)果表明:(1)從腫瘤樣品中分離出一株ALV-A毒株,經(jīng)全基因測(cè)序顯示該毒株與已分離的A亞群ALV毒株P(guān)DRC-1039、PDRC-3246、PDRC-3249同源性較高,分別為95.8%、95.9%和96.0%。(2)三個(gè)劑量的ALV-A人工感染7日齡鵪鶉后,在24d內(nèi)所有鵪鶉(0/15)均沒(méi)有檢測(cè)到
4、病毒血癥和泄殖腔排毒以及組織腫瘤;高劑量(106 TCID50/只)的ALV-A感染成年雞后21d內(nèi)有80%(4/5)的雞檢測(cè)出病毒血癥和泄殖腔病毒,且在內(nèi)臟組織中檢測(cè)到ALV-A病毒;感染成年鵪鶉后僅有17%(1/6)在第6天檢測(cè)到“一過(guò)性”病毒血癥,而泄殖腔沒(méi)有檢測(cè)到排毒現(xiàn)象;感染的成年鴿子(0/5)均沒(méi)有檢測(cè)病毒血癥和泄殖腔排毒,在鵪鶉和鴿子內(nèi)臟組織中也均未檢測(cè)到ALV-A病毒。(3)ALV-A亞單位疫苗抗原聯(lián)合CpG佐劑對(duì)種雞和
5、鵪鶉均能產(chǎn)生高效價(jià)的血清抗體,抗體陽(yáng)性率均達(dá)到100%(9/9和13/13);對(duì)孵化后的雛雞實(shí)施攻毒,病毒血癥為22%(2/9)、泄殖腔排毒率為22%(2/9)、死亡率為0%;對(duì)孵化后的鵪鶉實(shí)施攻毒,病毒血癥為15%(2/13)、泄殖腔排毒率0%(0/13)、死亡率為15%(2/13)。
結(jié)論:從我國(guó)地方黑土雞分離出一株ALV-A毒株;雞、鵪鶉和鴿子對(duì)外源性ALV-A易感性差別較大,其中雞較易感和易產(chǎn)生排毒,而鵪鶉和鴿子不易感
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