棉花ADP核糖基化因子基因GhARF的克隆.pdf

1、分離植物花粉發(fā)育相關(guān)基因,不僅有助于探明植物花粉發(fā)育的分子模式,還可以更好地推動(dòng)植物雄性不育基因工程和雜種優(yōu)勢利用的發(fā)展.棉花洞A雄性核不育系是1972年從洞庭一號(hào)棉花原種圃中發(fā)現(xiàn)的突變體,不育度高且穩(wěn)定,可育與不育花粉在單核期以前發(fā)育同步,是研究棉花花藥與花粉發(fā)育相關(guān)基因的理想材料.該研究利用差異片段GHA27為探針篩選棉花花藥cDNA文庫,獲得了ARF基因的全長cDNA序列,并進(jìn)一步作了序列和表達(dá)分析.實(shí)驗(yàn)主要得到以下結(jié)果：1.棉花

2、ARF基因的克隆;2.棉花ARF基因的序列分析;3.棉花ARF基因的同源性分析;應(yīng)用NCBI進(jìn)行DNA序列的相似性分析.4.ARF基因氨基酸序列的保守域;氨基酸序列分析表明,ARF基因編碼的氨基酸序列中具有保守的GTP結(jié)合區(qū)域.5.棉花ARF基因的表達(dá)分析;用地高辛將棉花ARF基因標(biāo)記為探針,與棉花洞A的不育株花藥、可育株花藥、可育花粉粒、葉片、花冠、胚根和胚珠的總RNA進(jìn)行斑點(diǎn)雜交.6.Southern blot分析.雜交結(jié)果顯示,A