45322.結構域ttapux21的研究

1、西南大學碩士學位論文結構域TtAPuX21的研究姓名：謝晚彬申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：謝和芳20060501西南大學碩士學位論文摘要NDAE的定性分析表明：“ItAPuX21能與水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖結合，因此分別以不同濃度的水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖為底物，進一步做NDAE的定量分析檢驗TtAPuX2I與它們結合能力的強弱。分別以0006％、0012％、0025％、O050％和0100／oTJ(溶性淀粉

2、為底物，仍以BSA作為對照蛋白，做NDAE定量分析。結果顯示：BSA在每一張凝膠中的遷移距離相等；而淀粉濃度越高，TtAPuX21在凝膠中的遷移距離越小，表明其遷移受到的阻礙越大。以淀粉濃度C(O000％)為自變量(x)，TtAPuX21在對照膠中的遷移距離D與其在試驗膠中的遷移距離d之差D—d(mm)為依變量0)，對C和D—d進彳亍直線回歸分析。計算表明：兩變量C和D—d存在顯著的直線回歸關系，直線回歸方程為p=21760192x。從

3、回歸系數可知：淀粉濃度C每增加O001％，遷移距離之差Dd增大0192mm，因TtAPuX21在對照膠中的遷移距離D不變，故其在試驗膠中的遷移距離d減少o192ram。簡而言之，淀粉濃度C每增加o001％，TtAPuX21在試驗膠中的遷移距離d減少0192mm。分別以0006％、0012％、0025％、O050％和O100％糊精為底物，做NDAE定量分析，結果表明：糊精濃度C每增加O001％，TtAPuX21在試驗膠中的遷移距離d減少o

4、11Imm。分別以O050％、o100％、0200％、O300％和0400％普魯蘭糖為底物，做NDAE定量分析，結果表明：普魯蘭糖濃度C每增加0001％，“ItAPuX21在試驗膠中的遷移距離d減少0025mna。綜上所述，水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖濃度C每增加0001％，“ItAPuX21在試驗膠中的遷移距離d分別減少0192mm、0111mm和0025mm；表明TtAPuX21在試驗膠中受水溶性淀粉的阻礙程度最大，受糊精韻阻礙程度次

5、之，受普魯蘭糖的阻礙程度最??；反應出nAPuX21與水溶性淀粉的結合能力最強，與糊精的結合能力次之，與普魯蘭糖的結合能力最弱。分別以不溶性淀粉和不溶性木聚糖為底物，通過SDSPAGE來檢驗TtAPuX21是否能與它們結合。取TtAPuX21蛋白，與不溶性淀粉混合，冰上孵育1h，漂洗數次，再經SDS變性處理后得樣品，進行SDSPAGE檢驗。結果顯示：SDS處理獲得的樣品其泳道沒有蛋白質條帶，表明TtAPuX21不能與不溶性淀粉結合。同樣方