16713.脂質(zhì)組學技術方法的建立及其應用研究

1、U“rsityofS‘ndTechnolog)ofChinaUniversityotcIenceandeCl3noloqyOt11naAdissertationformaster’SdegreeAThesisonLipidomicsStudy：Establishmentofthetechnique&methodforlipidc“anditsApplicati婦omicsanitsllCatlonlAuthor’SName：Specia

2、lity：Supervisor：Finishedtime：JiaojiaoMaOaCellBiologyProfFuquanYangSeptember30，2012摘要摘要脂質(zhì)組學就是對細胞、組織、生物體中的脂質(zhì)組成、含量，以及與其相互作用的分子進行全面系統(tǒng)的分析和鑒定，了解脂質(zhì)的結構與功能，進而揭示脂質(zhì)代謝與細胞、器官乃至機體的生理、病理過程之間的關系的一門學科。脂質(zhì)有許多重要的生物學功能，對其進行研究的脂質(zhì)組學作為代謝組學的一個分支

3、，受到越來越多的關注。脂質(zhì)組學的快速發(fā)展主要是得益于現(xiàn)代分離技術和質(zhì)譜技術等分析鑒定技術日趨成熟，從而使我們可以對生物樣品中的脂質(zhì)進行全面的定性和定量分析。本文第一章對脂質(zhì)組學研究進展進行了綜述，介紹了常用的脂質(zhì)檢測分析方法和質(zhì)譜的基本原理。第二章介紹了人血漿脂質(zhì)組學技術方法的初步建立。對現(xiàn)有的兩種脂質(zhì)提取的溶劑體系進行了進一步分析比較，最后經(jīng)綜合考慮選定甲基叔丁基醚(MTBE)／甲醇體系作為以后脂質(zhì)提取的方法。論文第三章在之前實驗的基

4、礎上系統(tǒng)開展了對模式生物線蟲脂質(zhì)組學的研究，包括定性和定量兩個方面的分析。秀麗隱桿線蟲是生物研究中一種非常理想的模式生物，尤其是在發(fā)育、遺傳學、神經(jīng)生物學、信號轉導、老化等領域。脂質(zhì)組的定性、定量分析有助于促進從功能基因組學的角度研究線蟲的代謝途徑。本章介紹了用MTBE／甲醇提取方法，使用TSQ通過前體離子和中性丟失掃描模式對N2和eat一2兩種線蟲的脂質(zhì)組進行分析，用LipidXplorerVl23對得到的質(zhì)譜數(shù)據(jù)進行處理。最后共鑒定

5、到磷脂酰膽堿(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰膽堿(LPC)等12類脂質(zhì)，其中N2鑒定到318個，eat一2鑒定到317個脂質(zhì)分子，對其中的一些脂質(zhì)進行了定量的分析，并在此基礎上系統(tǒng)的比較了兩種線蟲的脂質(zhì)組成，找到了一些有差異的脂質(zhì)分子。在對線蟲的脂質(zhì)組進行全面分析的同時，我們也基本上完成了脂質(zhì)分析方法的建立。本文的研究目標是建立一個包括鳥槍法脂質(zhì)組學和定向串聯(lián)質(zhì)譜(MS／MS)的高通量的分析方法，可以對線蟲中的脂質(zhì)分子進行全面