轉(zhuǎn)色前后葡萄果實(shí)糖代謝相關(guān)酶的特性研究.pdf

1、以中國(guó)野生葡萄毛葡萄(V. quinguangularis,Reld)商-24(Shang-24)和歐亞種葡萄赤霞珠(Cabernet Sauvignon)為試材,利用高效液相色譜(HPLC)、酶的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)、酶聯(lián)免疫(ELISA)和蛋白質(zhì)印跡(Western botting)等方法對(duì)兩個(gè)種葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)色前后有機(jī)酸和糖含量、與糖代謝相關(guān)酶及酚類物質(zhì)合成的關(guān)鍵酶進(jìn)行分析,以期為闡明葡萄果實(shí)糖代謝的酶學(xué)機(jī)理和通過生物技術(shù)改良葡萄品種以提高果實(shí)

2、的加工品質(zhì)提供理論依據(jù).實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),兩個(gè)種葡萄果實(shí)轉(zhuǎn)色后與轉(zhuǎn)色前相比:有機(jī)酸含量下降,其中蘋果酸比酒石酸下降的幅度大;含糖量增加;淀粉酶(α-淀粉酶和β-淀粉酶)、可溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)、蔗糖磷酸合酶(SPS)、蔗糖合酶(SS,分解方向和合成方向),苯丙氨酸解氨酶(PAL)均明顯升高.葡萄果實(shí)糖的積累主要以葡萄糖和果糖為主,毛葡萄商-24與歐亞種葡萄赤霞珠相比,其果實(shí)糖含量相對(duì)較低,而與糖積累相關(guān)的酶活性高,其原因是由于商-24果實(shí)中

3、高的PAL酶活使其大量的糖分參與了酚類物質(zhì)的合成.此外,β-淀粉酶和SAI活性的不同是引起兩個(gè)種糖代謝差異的主要原因.兩個(gè)種葡萄果實(shí)β-淀粉酶和酸性轉(zhuǎn)化酶的Western blotting結(jié)果表明:葡萄果實(shí)中β-淀粉酶的分子量為58kD;SAI的分子量為60kD,并首次在中國(guó)野生葡萄毛葡萄商-24果實(shí)中發(fā)現(xiàn)了SAI的一個(gè)同工酶,其分子量為105kD.毛葡萄商-24果實(shí)β-淀粉酶活性比赤霞珠高的原因?yàn)?其β-淀粉酶Km值小,表明其對(duì)底物的