黑曲霉α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶的產(chǎn)酶條件、純化及其性質(zhì)研究.pdf

1、該實驗室篩選到的一株黑曲霉(Aspergillus niger)M-1,能產(chǎn)生活性較強(qiáng)的α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶.本研究以黑曲霉M-1為出發(fā)菌株,對其α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶的產(chǎn)酶影響因素、純化、酶學(xué)性質(zhì)以及必需基團(tuán)進(jìn)行系統(tǒng)的研究,結(jié)果如下:通過對影響黑曲霉M-1產(chǎn)α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶的單位因素分析,得液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶的最適產(chǎn)酶條件為:4﹪A,2﹪B和1﹪G;在33℃,起始pH值為6.5,轉(zhuǎn)速為140r/min,接種量為6﹪,裝液量100mL條

2、件下,發(fā)酵4.0d,酶活力達(dá)296.05U/mL,添加0.1mmol/L的酶作用底物甲基-α-D-葡萄糖苷對產(chǎn)酶的誘導(dǎo)作用最大.通過硫酸銨分極分離,DEAE-cellulose52、DEAE-sepharose CL-6B和Sephadex G-100柱層析,SDS-PAGE等,從黑曲霉M-1酶提取液中分離純化得到α-葡萄糖轉(zhuǎn)苷酶,分子量約為110kDa.通過以甲基-α-D-葡萄糖苷為底物,對該酶的部分性質(zhì)進(jìn)行了研究.在一定條件下分別以