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文檔簡介
1、目的:體外環(huán)境下,探討刺梨提取物CL聯(lián)合金蕎麥提取物FR對人臍靜脈內(nèi)皮細胞株ECV-304增殖及凋亡的影響。在體模型下,CL聯(lián)合FR對雞胚尿囊膜血管新生的影響。
方法:IC30濃度CL/FR單藥和兩藥的1/2IC20濃度聯(lián)合應(yīng)用。MTT法檢測ECV-304細胞的增殖抑制率;流式細胞術(shù)檢測ECV-304細胞早期凋亡細胞比例;RT-PCR和Western blot法分析Ki-67及Bax、Bcl-2 mRNA/蛋白表達的變化。
2、雞胚尿囊膜法:計算經(jīng)100μg/ml CL、100μg/ml FR、CL50μg/ml+FR50μg/ml聯(lián)合作用后的7日齡雞胚尿囊膜血管受抑制的百分率。
結(jié)果:CL、FR單藥及聯(lián)合使用時均明顯抑制ECV-304細胞的生長,且呈劑量依賴性。48小時ECV-304細胞CL各濃度組(10μg/ml,40μg/ml,160μg/ml)的抑制率為10.67±0.83%,25.20±2.40%,47.33±4.51%,F(xiàn)R各濃度組(
3、15μg/ml,60μg/ml,240μg/ml)的抑制率7.33±0.30%,34.27±2.31%,55.20±0.82%,差異均具統(tǒng)計學意義(P<0.05)。IC30濃度的CL(50μg/ml)、FR(60μg/ml)和1/2IC30CL+1/2IC30FR(25+30μg/ml),對ECV-304細胞的抑制率分別為30.9±1.17%,32.9±1.37%,43.7±1.53%,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。流式細胞術(shù)結(jié)果
4、表明正常對照組、單藥組、聯(lián)合用藥組早期凋亡率依次增加,分別為5.12±0.28%,26.36±1.26%,29.27±2.39%42.71±2.07%,差異具統(tǒng)計學意義(P<0.05);與單獨用藥組比較,聯(lián)合用藥組Ki-67 Bcl-2mRNA/蛋白表達均顯著降低(P<0.05),而Bax mRNA/蛋白表達均顯著增高(P<0.05);雞胚尿囊膜實驗顯示CL、FR單獨和聯(lián)合應(yīng)用均可抑制雞胚尿囊膜新生血管的生長,CL作用更明顯。
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