出血型與非出血型人腦動靜脈畸形Notch1、Dll4、EphrinB4、EphB4、Ang2、Tie2因子的表達比較研究.pdf

1、目的:腦動靜脈畸形(BAVM)是青少年致死、致殘的最常見的出血性腦血管病之一，其發(fā)生和破裂出血的機制與新生血管生成有關(guān)，血管生成受多種細胞因子的調(diào)控，但具體機制不清。文獻報道多種生成因子在BAVM中是呈高表達，其破裂出血的機制可能也與多種細胞因子密切相關(guān)，本研究Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2因子是否與BAVM破裂出血有相關(guān)性，在出血型與非出血型人腦動靜脈畸形的表達上是否存在差異及在BAVM的表達

2、上是否存在相關(guān)關(guān)系，為BAVM的發(fā)生及出血機制提供相關(guān)線索，對BAVM疾病更有效的治療提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　 方法:
　　 1.免疫組化:醫(yī)院病理科調(diào)取腦動靜脈畸形蠟塊標本52例（其中出血型腦動靜脈畸形蠟塊標本42例，未出血型10例），切5微米厚切片進行Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2，Tie2蛋白免疫組化染色，使用光鏡觀察BAVM的結(jié)構(gòu)特點，用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理分析

3、在出血型與未出血型BAVM中Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2，Tie2蛋白的表達是否有統(tǒng)計學(xué)上差異，并分析D114、Ang2、EphrinB2、EphB4在BAVM中的表達上是否有相關(guān)性。
　　 2.real-time PCR:出血型腦動靜脈畸形團標本18例，未出血型5例（其中2例為新鮮畸形團標本，石蠟標本中提取合格RNA3例）。用real-time PCR檢測兩組BAVM內(nèi)基因Notch1/D11

4、4，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2基因的表達變化.SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析在出血型與未出血型BAVM中Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2基因的表達是否存在統(tǒng)計學(xué)上差異。
　　 3.WB分析:出血型腦動靜脈畸形團標本18例，未出血型2例。出血型與未出血型BAVM中Notch1/D114，EphrinB2/EphB4，Ang2/Tie2蛋白的表達是否存在差異。
　　

5、 結(jié)果:
　　 1.免疫組化染色顯示:Notch1，D114，EphrinB2，EphB4，Ang2主要表達于BAVM血管內(nèi)皮細胞及平滑肌細胞，Tie2蛋白在BAVM中未見明顯表達，Notch1在兩組表達陽性率的比較結(jié)果無顯著性差異的。D114，EphrinB2，EphB4,Ang2均有顯著性差異，在BAVM中D114分別與Ang2、EphrinB2及EphB4有一定的相關(guān)性，EphB4與Ang2相關(guān)，EphrinB2與Ang2

6、無明顯相關(guān)。
　　 2.real-time PCR檢測中D114，EphrinB2，EphB4，Ang2在出血性標本表達的陽性率均明顯高于非出血標本，Tie2在出血性標本表達的陽性率均低于非出血標本，其中D114，EphrinB2，EphB4，Ang2差異有統(tǒng)計學(xué)意義。Notch1在兩者間的表達無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3..WB分析結(jié)果:D114，EphrinB2，EphB4，Ang2蛋白在出血型動靜脈畸形表達的陽性率均高