Notch1、Dll4在糖尿病性視網(wǎng)膜病變新生血管形成中的作用研究.pdf

1、目的：通過檢測Notch1、Delta-like4（Dll4）和血管內皮生長因子受體2（vascular endothelial growth factor receptor2，VEGFR2）在增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變（proliferative diabetic retinopathy，PDR）患者視網(wǎng)膜前纖維血管膜及非糖尿病伴特發(fā)性黃斑前膜患者黃斑前膜中的表達，初步探討 Notch1、Dll4在PDR新生血管形成中的作用及與VE G

2、F信號通路的關系。
　　方法：將玻璃體切割術中取出的60眼PDR患者的視網(wǎng)膜前纖維血管膜作為實驗組，其中術前2-7天行玻璃體腔內抗 VEGF藥物 Lucentis注射28眼，未行玻璃體腔內Lucentis注射32眼。以18眼非糖尿病伴特發(fā)性黃斑前膜患者的黃斑前膜作為對照組，應用熒光定量聚合酶鏈式反應（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）檢測各組樣本中No

3、tch1、Dll4、VEGFR2的mRNA表達量，采用HE染色計數(shù)纖維血管膜中新生血管內皮細胞數(shù)目、免疫組織化學染色法檢測Notch1、Dll4、VEGFR2的蛋白表達。
　　結果：
　　1.RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)：PDR未注藥組、PDR已注藥組及黃斑前膜對照組中，Notch1 mRNA、Dll4 mRNA、VEGFR2 mRNA的相對表達量均具有統(tǒng)計學差異（HNotch1 mRNA=12.500，PNotch1 mRNA=0

4、.002<0.05；HDll4 mRNA=12.500，PDll4 mRNA=0.002<0.05；HVE GFR2 mRNA=12.020，PVEGFR2 mRNA=0.002<0.05）。其中：（1）PDR組Notch1、Dll4、VEGFR2表達顯著高于黃斑前膜組。（2）PDR已注藥組較未注藥組，VEGFR2的表達降低，Notch1、Dll4的表達也隨之降低。采用spearman相關性分析得：VEGFR2與Dll4、VEGFR2與

5、Notch1、Notch1與Dll4之間的mRNA表達水平呈顯著相關（P＜0.05），相關系數(shù)分別為：0.83、0.81、0.87。
　　2.免疫組化結果顯示：在所有的60眼PDR纖維血管膜中，均有Notch1、Dll4、VEGFR2的表達，未注藥組患者Notch1、Dll4、VEGFR2的蛋白表達量均高于已注藥組，差異具有統(tǒng)計學意義（PNotch1=0.030、PDll4=0.008、PVEGFR2=0.023）。在未注藥組，纖