利用柑橘莖段誘導(dǎo)不定芽改進微芽嫁接脫毒技術(shù)的研究.pdf

1、本實驗進行了成年態(tài)柑橘莖段離體培養(yǎng)試驗，并利用離體培養(yǎng)產(chǎn)生的不定芽進行莖尖微芽嫁接，得到了成活苗；同時對帶明顯黃化斑駁癥狀和未顯癥狀的母本樹不同柑橘品種進行微芽嫁接，均獲得了成活苗，并對通過兩種不同來源的莖尖嫁接成活的植株進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測。主要的結(jié)果如下： 1.通過改進的消毒方法，減少了成年態(tài)柑橘莖段離體培養(yǎng)的污染率。試驗表明，在炎熱干燥的夏季晴天午后2點左右取半木質(zhì)化莖段作為外植體培養(yǎng)材料，采用間隔2天消毒方法

2、，能夠?qū)⑶o段污染率控制在10％以內(nèi)。 2.通過對莖段離體培養(yǎng)，獲得了莖段嫩芽，并且得到了幾個品種的初代培養(yǎng)配方；對離體培養(yǎng)得到的嫩芽進行微芽嫁接，獲得了成活的植株，成活率相對于田間的嫩芽都有不同程度的提高，最高的達到80％。 3.用不同濃度的6-BA對來自田間的莖尖進行不同時間的處理，效果存在較大的差別，試驗發(fā)現(xiàn)用0.5mg/L至1.0mg/L的6-BA浸泡莖尖10min對供試品種成活率有不同程度的提高，最高的可達60％

3、。 4.用兩種不同濃度的消毒劑不同時間的處理各個供試柑橘品種的莖尖，微芽嫁接成活率表現(xiàn)出不同的效果。試驗結(jié)果表明，用2％NaClO消毒7min效果較好。 5.根據(jù)黃龍病的病原的核苷酸序列設(shè)計PCR引物。利用PCR對帶明顯黃化斑駁癥狀的紅江橙、宮川和通過莖尖微芽嫁接的成活的紅江橙和宮川嫁接植株進行檢測，結(jié)果帶毒癥狀的植株擴增到特異性擴增區(qū)帶，而嫁接的植株沒有特異性區(qū)帶，證明了莖尖微芽嫁接脫除了柑橘黃龍病病原，可以作為無病毒