普通絲瓜子葉節(jié)直接不定芽誘導(dǎo)研究.pdf

1、為建立高效穩(wěn)定的絲瓜離體快繁體系和開(kāi)展絲瓜的遺傳轉(zhuǎn)化研究，本試驗(yàn)以普通絲瓜的子葉節(jié)為外植體，采用直接器官發(fā)生途徑，比較系統(tǒng)地研究了子葉節(jié)直接不定芽誘導(dǎo)的技術(shù)體系，初步探討了幼苗苗齡、基因型、切割方式、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、蔗糖及AgN03濃度等對(duì)普通絲瓜子葉節(jié)直接不定芽誘導(dǎo)的影響。結(jié)果表明： (1)不同苗齡對(duì)子葉節(jié)直接不定芽的誘導(dǎo)有極顯著的影響，試驗(yàn)表明5.7d苗齡(子葉擴(kuò)展期或子葉旺盛生長(zhǎng)期)是不定芽誘導(dǎo)的最佳時(shí)期； (2)

2、子葉節(jié)的不同切割方式對(duì)直接不定芽的誘導(dǎo)率有顯著影響，對(duì)出芽數(shù)有極顯著影響，去除頂芽和腋芽、下胚軸縱切、保留2mm左右下胚軸、切除子葉的1/2為最佳切割方式； (3)不同種類(lèi)和濃度的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)子葉節(jié)不定芽的誘導(dǎo)率和出芽數(shù)有極顯著的影響，其中BA具有關(guān)鍵作用；不同生長(zhǎng)素種類(lèi)也有重要影響，其中2,4-D的誘導(dǎo)率為零，而其他生長(zhǎng)素對(duì)不定芽的誘導(dǎo)有促進(jìn)作用，尤其是添加低濃度的IBA有助于不定芽的發(fā)生，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+BA1.

3、0mg/L+IBA0.5mg/L，不定芽誘導(dǎo)率可達(dá)80-87.5％，不定芽出芽數(shù)可達(dá)5.87-7.3個(gè)/外植體； (4)不同基因型對(duì)不定芽誘導(dǎo)率和每外植體出數(shù)均有極顯著的影響，其中“早熟香絲瓜”的誘導(dǎo)效果最差，極顯著地低于其他三個(gè)肉絲瓜品種，“大皺皮肉絲瓜”和“湖南肉絲瓜”的誘導(dǎo)效果最好； (5)不同蔗糖濃度對(duì)絲瓜子葉節(jié)不定芽誘導(dǎo)率無(wú)顯著影響，但對(duì)不定芽出芽數(shù)有極顯著影響，濃度過(guò)低(10g/L)或過(guò)高(60g/L)出芽數(shù)

4、都低，而且，蔗糖有利于不定芽的生長(zhǎng)，隨著蔗糖濃度的增高，芽生長(zhǎng)健壯，伸長(zhǎng)明顯； (6)添加低濃度(1.0、2.0mg/L)的AgNO3對(duì)不定芽的誘導(dǎo)率無(wú)顯著影響，但能明顯抑制愈傷組織的分化，當(dāng)濃度達(dá)到4.0mg/L時(shí)，不定芽誘導(dǎo)率顯著降低，外植體泛黃，活力受到明顯抑制，同時(shí)畸形芽數(shù)量增加； (7)細(xì)胞分裂素的種類(lèi)對(duì)不定芽的增殖倍數(shù)無(wú)顯著影響，而細(xì)胞分裂素的濃度對(duì)增殖倍數(shù)有極顯著影響，添加細(xì)胞分裂素能顯著提高增值倍數(shù)，但濃