沉默Aurora-B通過(guò)PI3K-Akt-NF-κB信號(hào)通路抑制骨肉瘤細(xì)胞侵襲和遷移的體外研究.pdf

1、I分類號(hào)：密級(jí)：UDC：學(xué)號(hào)：406521212485南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文沉默沉默AuraB通過(guò)通過(guò)PI3KAktNFκB信號(hào)通路抑制骨肉瘤細(xì)胞侵襲和遷移的體外研究信號(hào)通路抑制骨肉瘤細(xì)胞侵襲和遷移的體外研究KnockdownofAuraBinhibitsosteosarcomacellinvasionmigrationviamodulatingPI3KAktNFκBsignalingpathway朱糧博朱糧博培養(yǎng)單位（院、系）：南

2、昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：舒勇主任醫(yī)師教授博士生導(dǎo)師劉志禮副主任醫(yī)師副教授碩士生導(dǎo)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：外科學(xué)（骨科）論文答辯日期：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助（No.81260400）江西省教育廳科學(xué)基金項(xiàng)目資助（No.GJJ12097）江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助（No.20142BAB205056）答辯委員會(huì)主席：評(píng)閱人：年月日摘要II摘要摘要目的目的:本研究旨在體外探討沉默AuraB基因表達(dá)通過(guò)PI3KA

3、ktNFκB信號(hào)通路對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞的侵襲和遷移的影響。方法：方法：構(gòu)建干擾AuraB基因表達(dá)的慢病毒載分別命名為L(zhǎng)VshAURKB（LVshAURKB1、LVshAURKB2、LVshAURKB3）和陰性對(duì)照載體LVNC。分別轉(zhuǎn)染人骨肉瘤細(xì)胞株U2OS細(xì)胞和HOS細(xì)胞。qRTPCR檢測(cè)AuraB基因的mRNA水平。Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和劃痕愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U2OS細(xì)胞和HOS細(xì)胞侵襲和遷移情況。采用免疫組化方法研究24例伴有肺轉(zhuǎn)移的骨

4、肉瘤標(biāo)本中AuraB和pAkt（Ser473）蛋白的表達(dá)情況，并分析它們的相關(guān)性。WesternBlot檢測(cè)轉(zhuǎn)染LVshAURKB后AuraB、pAkt（Ser473）、Akt、pPI3K(Tyr199)、PI3K、NFκB（p65）、βactin蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：結(jié)果：①qRTPCR和WesternBlot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示與對(duì)經(jīng)轉(zhuǎn)染陰照載體組對(duì)比，轉(zhuǎn)染了LVshAURKB組骨肉瘤細(xì)胞的AuraB的mRNA和蛋白水平明顯降低；②Trans