吳茱萸堿抑制人骨肉瘤細(xì)胞143B增殖與PI3K-Akt信號(hào)關(guān)系的研究.pdf

1、骨肉瘤是臨床上最為常見的骨組織惡性腫瘤，多種抗腫瘤藥物的聯(lián)合應(yīng)用治療骨肉瘤已經(jīng)被引入臨床超過40年，但是，仍有超過80％的早期局限性骨肉瘤的患者會(huì)全身轉(zhuǎn)移。因此，非常有必要尋求一種新型更加有效的方式來治療骨肉瘤。
　　本實(shí)驗(yàn)小組通過結(jié)晶紫染色和定量分析、Western blot、PCR、Annexin V-EGFP染色以及流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)：EVO既能顯著地抑制143B細(xì)胞的增殖，又能誘導(dǎo)143B細(xì)胞的凋亡，并且呈現(xiàn)出了濃度依賴性

2、和時(shí)間依賴性；我們在裸鼠上建立了異位成瘤模型，從取出的大體標(biāo)本看出，EVO實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較，EVO能明顯減小瘤塊的體積與重量。H&E染色與免疫組織化學(xué)染色結(jié)果均顯示，EVO能呈現(xiàn)濃度依賴性的提高骨肉瘤細(xì)胞的壞死率。
　　通過Western blot和PCR實(shí)驗(yàn)，我們證實(shí)了相對(duì)于對(duì)照組，EVO實(shí)驗(yàn)組能呈濃度依賴性的提高PTEN在143B細(xì)胞中的表達(dá)。結(jié)晶紫實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，外源性的PTEN能夠增強(qiáng)EVO對(duì)于143B的增殖抑制作用，沉

3、默PTEN能夠逆轉(zhuǎn)EVO對(duì)于143B的增殖抑制。此外，PTEN抑制劑（VO-Ohpic）同樣能夠逆轉(zhuǎn)EVO對(duì)于143B的增殖抑制作用。結(jié)果提示，PTEN基因參與了EVO對(duì)于骨肉瘤的增殖抑制作用
　　本實(shí)驗(yàn)通過給予外源性的Ad-PTEN，siAd-PTEN以及Western blot蛋白功能鑒定，分析了PTEN在EVO對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞143B的增殖抑制作用中與PI3K/Akt的相互關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，EVO呈濃度依賴性抑制磷酸化Akt（p