微波消融原位瘤苗聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除對(duì)小鼠抗肝癌免疫的影響.pdf

1、目的：研究微波消融原位瘤苗聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除對(duì)小鼠抗肝癌免疫的影響。方法：通過(guò)小鼠皮下注射Hepa1-6肝癌細(xì)胞建立小鼠皮下肝癌模型，將小鼠分為單純消融組(MWA組)、消融聯(lián)合細(xì)胞因子緩釋微球組(ISV組)、消融聯(lián)合調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除組(MWA+Treg depletion組)、消融聯(lián)合細(xì)胞因子緩釋微球及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞清除組(ISV+Treg depletion組)4組，對(duì)各組進(jìn)行相應(yīng)干預(yù)，待腫瘤消退1個(gè)月后在對(duì)側(cè)皮下再次接種等量Hepa

2、1-6肝癌細(xì)胞再刺激，2周后取小鼠外周血，分離單核細(xì)胞行流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD4+T細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在外周血淋巴細(xì)胞中所占比例的變化。取小鼠脾臟行免疫組化檢測(cè)CD8+T細(xì)胞及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量的變化，分離脾臟淋巴細(xì)胞與滅活的Hepa1-6細(xì)胞共培養(yǎng)，ELISPOT法檢測(cè)淋巴細(xì)胞分泌INF-γ的情況。
　　 結(jié)果：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血CD4+T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞比例，MWA組占12.50％，ISV組占13.30％，MWA+Treg d

3、epletion組占16.65％，ISV+Tregdepletion組占24.22％。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞占淋巴細(xì)胞比例，MWA組占2.50％，ISV組占2.37％，MWA+Treg depletion組占2.24％，ISV+Treg depletion組占1.83％。免疫組化觀(guān)察各組脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量，ISV+Treg depletion組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量少于ISV組及MWA+Treg depletion組，ISV組及MWA+Treg d

4、epletion組調(diào)節(jié)性T細(xì)胞明顯少于MWA組；脾臟CD8+T細(xì)胞數(shù)量ISV+Treg depletion組高于其他三組，MWA組數(shù)量最少。ELISOT檢測(cè)INF-γ分泌：ISV+Treg depletion組為292 IFN-γSFCs/106；MWA+Treg depletion組為55 IFN-γSFCs/106；ISV組為30 IFN-γSFCs/106；MWA組為18IFN-γSFCs/106。ISV+Treg depleti

5、on組IFN-γ分泌要多于MWA+Treg depletion組(P＜0.05)，ISV組(P＜0.05)及MWA組(P＜0.05)。MWA+Treg depletion組IFN-γ分泌多于ISV組(P＜0.05)及MWA組(P＜0.05)。ISV組IFN-γ分泌多于MWA組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：微波消融原位瘤苗聯(lián)合全身調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞清除可有效減少調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)淋巴細(xì)胞INF-γ的釋放，增強(qiáng)小鼠的抗肝癌免疫。