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文檔簡介
1、目的:體外培養(yǎng)rMSCs并觀測其特性,觀察rMSCs體內促進大鼠隨機皮瓣存活的作用并探討其可能的機制。 方法:體外分離培養(yǎng)rMSCs,流式細胞儀(FCM)檢測其表面標志。盯一PCR檢測rMSCs的血管內皮細胞生長因子(VEGF)表達情況。Western-blotting檢測rMSCs培養(yǎng)液的VEGF。SD大鼠隨機分成2組:rMSCs組、對照組,于背部形成L5cmX8cm的超長隨意皮瓣。以4’,6--脒基一2一苯吲哚(DAPI)標
2、記rMSCs,消化、離心、計數(shù),注射于皮下,術后7天觀察皮瓣的存活情況,計算皮瓣壞死率。取皮瓣遠端標本,行HE染色觀察組織學情況。免疫組化測移植組與對照組的VEGF表達情況。結果:rMSCs體外分離培養(yǎng)擴增5代,細胞數(shù)可達l×10",具有多態(tài)性和貼壁生長特性,F(xiàn)CM檢測CD34、CD45陰性,CD29、CD90陽性表達。體外培養(yǎng)rMSCs能表達VEGF。術后七天,在移植組皮下能檢測到DAPI標記的細胞,移植組大鼠皮瓣壞死率明顯小于對照組
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