人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對提高大鼠隨機(jī)皮瓣存活率的研究.pdf

1、目的：
　　近年研究發(fā)現(xiàn)，人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞能分泌大量的成血管性細(xì)胞因子，在下肢缺血模型的肌肉中及急性心肌缺血的梗死處，局部移植人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，能促進(jìn)血管形成，增加血供，改善功能。為了初步研究并探討人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體內(nèi)促進(jìn)任意皮瓣存活的可能性，我們通過對大鼠背部注射人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，建立大鼠背部超長任意皮瓣模型，來探究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞在體內(nèi)存活的情況及對任意皮瓣存活的影響，進(jìn)而為其在臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)及思路。
　

2、　方法：
　　通過處理我院產(chǎn)科足月剖宮產(chǎn)術(shù)后廢棄的臍帶分離出間充質(zhì)組織，即華爾通膠質(zhì)（Wharton's jelly），用組織貼壁法進(jìn)行體外培養(yǎng)原代 HuMSCs，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及擴(kuò)增情況，取第三代HuMSCs并以羰花青親脂性熒光染料(CM-Dil)對其進(jìn)行標(biāo)記，將已融合的 HuMSCs制成細(xì)胞懸液并注射于大鼠左側(cè)背部標(biāo)識皮下，大鼠右側(cè)對照注射PBS液體，于7天后在大鼠兩側(cè)背部分別形成超長隨意皮瓣。左右分別為HuMSC

3、s注射組和PBS對照組。術(shù)后大體觀察左右皮瓣的存活情況并計(jì)算皮瓣壞死率。于第7天取皮瓣遠(yuǎn)端標(biāo)本，觀察 CM-Dil標(biāo)記的HuMSCs移植后成活分布情況，行常規(guī)病理組織切片hematoxylin&eosin(H&E)染色、觀察標(biāo)本的皮下血管數(shù)。
　　結(jié)果：
　　術(shù)后7天，在移植HuMSCs組即左側(cè)背部皮下能檢測到 CM-Dil標(biāo)記的細(xì)胞，移植HuMSCs組大鼠皮瓣壞死率明顯小于PBS對照組（P<0.05），移植HuMSCs組的