膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞分化抑制、自噬活性與轉(zhuǎn)分化的研究.pdf

1、蘇州大學(xué)博士學(xué)位論文膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞分化抑制、自噬活性與轉(zhuǎn)分化的研究姓名：趙耀東申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：黃強(qiáng)20090401膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞分化抑制、自噬活性與轉(zhuǎn)分化的研究中文摘要要意義，特別是自噬小體數(shù)量的變化值得進(jìn)一步研究。【關(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞神經(jīng)干祖細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)電子顯微鏡第二部分膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞分化抑制與其自噬活性低下相關(guān)【目的】在第一部分研究中觀察到了GSPCs中自噬小體的數(shù)量明顯少于NSPCs，本研究觀察其是否

2、存在自噬活性的變化，以及這種變化與GSPCs分化抑制的關(guān)系?！痉椒ā坷玫谝徊糠种信囵B(yǎng)所得的GSPCs和NSPCs，分別用單丹(磺)酰戊二胺MDC染色、微管相關(guān)蛋白輕鏈3(microtubuleassociatedproteinlightchain3，LC3，LC3)免疫熒光染色、westemblot法檢測LC3II／LC3I等多種方法檢測GSPCs與NSPCs中自噬活性的差異。檢測GSPCs分化后的自噬活性，在誘導(dǎo)GSPCs分化同時加

3、入自噬抑制劑3甲基腺嘌呤(methyladenine，3MA)或BafilomycinA1(BFA)，觀察抑制自噬是否可以抑制GSPCs的分化。自噬激活劑雷帕霉素(rapamycin，RPM)被用于檢測是否能促進(jìn)GSPCs的分化。【結(jié)果】自噬在GSPCs中的活性明顯低于其在NSPCs中的活性。當(dāng)誘導(dǎo)GSPCs分化后，其自噬活性增高；自噬的抑制劑3MA或BFA作用于GSPCs可以抑制后者貼壁分化，westernblot分析提示經(jīng)上述自噬抑

4、制劑作用后的GSPCs的GFAP以及MAP2的表達(dá)量較未加抑制劑的對照組降低。自噬的活化劑RPM在適當(dāng)?shù)臈l件下可以促進(jìn)GSPCs的貼壁分化?！窘Y(jié)論】通過自噬抑制劑或活化劑從正反兩方面證實GSPCs的自噬活性與其分化抑制相關(guān)，為進(jìn)一步探索發(fā)生這種變化的分子機(jī)制打下了基礎(chǔ)?！娟P(guān)鍵詞】膠質(zhì)瘤干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞細(xì)胞分化自噬第三部分弟二郡分膠質(zhì)瘤干祖細(xì)胞自噬活性低下與PTEN基因失活相關(guān)【目的】PTEN是一種與自噬密切相關(guān)又常常在神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中失活