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文檔簡介
1、目的:本文旨在探討奧氮平(olanzapine)的抗膠質(zhì)瘤作用及其可能的作用機制。
方法:體外實驗選用膠質(zhì)瘤T98和LN229細胞。MTT法檢測不同濃度的奧氮平(0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mΜ),作用不同時間后對兩個膠質(zhì)瘤細胞株的增殖的影響。Western blot檢測自噬相關(guān)蛋白LC3、p62和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的變化,免疫熒光檢測自噬熒光顆粒的形成與分布情況。Hoechst33258染色以及 A
2、nnexin V-FITC/PI實驗檢測不同濃度奧氮平處理后,兩個細胞凋亡的情況。MTT和集落形成實驗分析自噬抑制劑3MA對奧氮平抑瘤作用的影響。LN229細胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,口服給以奧氮平,繪制腫瘤體積生長曲線,觀察奧氮平抑制腫瘤生長的作用。Western blot檢測腫瘤組織中自噬相關(guān)蛋白LC3、p62和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達的情況。免疫組化分析法分析各組移植瘤中增殖指數(shù)Ki-67和凋亡相關(guān)蛋白caspase-3的表達
3、情況。
結(jié)果:MTT結(jié)果顯示,奧氮平對兩株膠質(zhì)瘤細胞LN229和T98均有抑制作用,且呈劑量依賴性和時間依賴性。LC3、p62的蛋白表達情況以及免疫熒光檢測LC3的顆粒形成與分布情況都顯示奧氮平能夠在這兩株細胞中誘導自噬。Western blot分析Bcl-2蛋白表達、Hoechst33258染色實驗以及V-FITC/PI染色實驗表明,奧氮平能夠促進LN229和T98細胞凋亡。MTT和集落形成實驗表明,自噬抑制劑3MA減弱了奧
4、氮平對這兩株細胞的增殖抑制作用。裸鼠皮下移植瘤體積曲線說明,奧氮平能夠在體內(nèi)抑制膠質(zhì)瘤的生長。Western blot分析移植瘤的Bcl-2蛋白表達,顯示奧氮平能夠促進移植瘤凋亡;LC3和p62蛋白表達顯示,高劑量奧氮平在體內(nèi)皮下移植瘤中誘導自噬。免疫組化分析移植瘤組織中Ki-67和caspase-3陽性表達結(jié)果顯示,奧氮平抑制裸鼠皮下移植瘤的增殖并且促進其凋亡。
結(jié)論:奧氮平在體外、體內(nèi)都能夠抑制膠質(zhì)瘤的生長。其抗膠質(zhì)瘤作用
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