水皰口炎病毒的M蛋白基因聯(lián)合熱療治療腫瘤的實驗研究.pdf

1、目的：M蛋白(matrix protein)是水皰口炎病毒(vesicular stomatitis virus，VSV)的最重要的結(jié)構(gòu)功能蛋白，它可抑制宿主基因的表達、使宿主細胞變圓、在缺少病毒其他成分的情況下直接誘導腫瘤細胞凋亡。本實驗室采用的脂質(zhì)體包裹M蛋白基因(Lip-MP)，已經(jīng)初步證實其在體外和體內(nèi)均通過誘導腫瘤細胞凋亡產(chǎn)生顯著的抗腫瘤活性。因此，M蛋白基因可以作為抗腫瘤的潛在基因。熱療(Hyperthermia，HT)是用

2、加熱方式治療腫瘤的一種方法，通過直接細胞毒作用、細胞凋亡效應、激發(fā)免疫反應及改變腫瘤內(nèi)微循環(huán)，從而殺傷腫瘤細胞。腫瘤是全身性疾病，腫瘤治療不再是單一治療，綜合治療已成為趨勢。脂質(zhì)體包裹M蛋白基因和熱療都具有較強的抗腫瘤效應，兩種治療手段的作用機制和毒副作用不完全相同，所以我們設想聯(lián)合應用M蛋白基因和局部熱療是否能更強的誘導腫瘤細胞凋亡，產(chǎn)生更強的抗腫瘤應? 方法：我們用DOTAP：Chol脂質(zhì)體包裹M蛋白基因和質(zhì)?？蛰d體制備脂質(zhì)

3、體DNA復合物(Lip-MP和Lip-null)來進行抗腫瘤體內(nèi)實驗。腫瘤模型選用的是Meth A纖維肉瘤BALB/c小鼠腫瘤模型和C'I、26結(jié)腸癌BALB/c小鼠腫瘤模型。具體治療方案是將兩種腫瘤模型分別予生理鹽水(NS)、單純熱療(HT)、Lip-null、Lip-MP、Lip-null加熱療和Lip-MP加熱療處理，每4天一次，共治療4次。治療期間，每4天測量小鼠腫瘤體積，觀察小鼠活動、食欲、皮毛等。治療結(jié)束后1周，處死5只小鼠

4、做病理切片，其余觀察生存期。 結(jié)果：在Meth A纖維肉瘤腫瘤模型中，Lip-MP加熱療導致更強的抗腫瘤效應，治療后32天腫瘤的體積明顯小于NS組、HT組、Lip-null組、Lip-MP和Lip-null加熱療組(P<0.05)，部分腫瘤完全消退。我們通過計算協(xié)同系數(shù)Q>1證明了Lip-MP和熱療有協(xié)同效應。Lip-MP加熱療組小鼠的生存期比其他組明顯延長(P<0.05)，而且在Lip-MP加熱療聯(lián)合治療組小鼠的殘存腫瘤中，凋

5、亡細胞明顯增多。在CT 26結(jié)腸癌腫瘤模型中，我們得到了與Meth A模型類似的結(jié)果。在治療28天后，Lip-MP加熱療組較其他組的腫瘤體積明顯減小(P<0.05)，小鼠生存期顯著延長(P<0.05)，病理切片凋亡也是大量增多的，從而進一步提示Lip-MP聯(lián)合熱療引起更強的抗腫瘤效應，兩種治療方法具有協(xié)同作用。 結(jié)論：我們的實驗結(jié)果表明Lip-MP聯(lián)合熱療能增強誘導腫瘤細胞凋亡，產(chǎn)生更強的抗腫瘤效應，為腫瘤綜合治療提供了新思路。