靜脈注射脂質(zhì)體包裹的M蛋白基因治療小鼠實驗性肺轉(zhuǎn)移腫瘤的實驗研究.pdf

1、學(xué)校代碼：10610學(xué)號：S032755四川大學(xué)碩士學(xué)位論文靜脈注射脂質(zhì)體包裹的M蛋白基因治療題目生!屢塞墮絲韙整整壁擅鮑塞墅煎窒一一二oo六年四月四川大學(xué)碩士學(xué)位論文靜脈注射脂質(zhì)體包裹的M蛋白基因治療小鼠實驗性肺轉(zhuǎn)移腫瘤的實驗研究研究生刁鵬導(dǎo)師魏于全教授摘要背景和目的；水泡性口炎病毒(VSV)基質(zhì)(M)蛋白是VSV病毒顆粒的結(jié)構(gòu)蛋白，可以直接誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。本實驗室初步證實轉(zhuǎn)染M蛋白基因具有誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡抑制腫瘤生長的作用，可以作

2、為腫瘤基因治療的候選治療基因。為此，我們利用實驗性肺轉(zhuǎn)移腫瘤動物模型，觀察靜脈注射脂質(zhì)體包裹的M蛋白基因抑制實驗性肺轉(zhuǎn)移腫瘤結(jié)節(jié)形成的作用。方法：用DOTAP：Chol脂質(zhì)體包裹M蛋白基因和質(zhì)?？蛰d體制備脂質(zhì)體DNA復(fù)合物(Lip一^IP和Lipnull)，以BALB／c小鼠建立CT26結(jié)腸癌實驗性肺轉(zhuǎn)移模型，將小鼠隨機分為生理鹽水(Saline)組、脂質(zhì)體包裹空載體(Lipnull)組和脂質(zhì)體包裹M蛋白基因(Lip—MP)組，在接種腫

3、瘤細胞后第3天分別給予200ulSaline、200ulLip—null(50ugDNA)和200ulLipMP(50ugDNA)等相應(yīng)的處理，每2天1次，共6次。接種腫瘤細胞15天后每組隨機處死5只小鼠，全肺稱重，計數(shù)肺表面腫瘤轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)；其余l(xiāng)O只觀察小鼠生存期。HE染色評估全肺病理改變。TUNEL染色檢測腫瘤細胞的凋亡情況。為評價LipMP復(fù)合物對小鼠肝功能的影響，以正常昆明鼠為研究對象，尾靜脈給予上述單劑量的不同處理，48小時后