水皰口炎病毒誘導(dǎo)人類鼻咽癌凋亡和抗腫瘤作用的研究.pdf

1、水皰口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)能選擇性地侵入大多數(shù)腫瘤細(xì)胞，并迅速復(fù)制、殺傷這些腫瘤細(xì)胞。在體外培養(yǎng)人鼻咽癌HNE-1細(xì)胞株，分別給予濃度梯度的VSV處理。濃度梯度按照每個腫瘤細(xì)胞給予不同感染復(fù)數(shù)(multiplicity of infection，moi)的VSV病毒，即0.1 moi、1moi、10 moi、100 moi組和空白對照共6個組。在倒置顯微鏡下觀察各組腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)的細(xì)胞病

2、變。單核細(xì)胞直接細(xì)胞毒性測定(MTT reductionassay，MTT)分析VSV處理導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞殺傷作用，HO 33258(Hoechst33258)染色熒光顯微鏡檢測VSV誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞凋亡。用裸鼠BALB／c品系(BALB／c-nude，BALB／c-T淋巴細(xì)胞功能缺陷裸小鼠)建立人HNE-1鼻咽癌的BALB／c裸鼠腫瘤模型，研究VSV治療有無誘導(dǎo)凋亡和抗鼻咽癌腫瘤效應(yīng)。并統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果。 我們的實(shí)驗(yàn)表明在體

3、外培養(yǎng)人類鼻咽癌HNE-1細(xì)胞，VSV處理后，在倒置顯微鏡下觀察到腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞病變。MTT實(shí)驗(yàn)表明VSV有殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，并且細(xì)胞存活率隨VSV的moi增加而減少。HO 33258染色熒光顯微鏡檢測發(fā)現(xiàn)VSV能誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞凋亡。人HNE-1鼻咽癌BALB／c裸鼠腫瘤模型予以VSV治療，VSV的抗腫瘤效應(yīng)明顯，沒有明顯的不良反應(yīng)。治療組小鼠的殘存腫瘤中凋亡細(xì)胞明顯增多。 目的：通過體外培養(yǎng)觀察水皰口炎病毒對人類

4、鼻咽癌HNE-1細(xì)胞株的抗腫瘤作用和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。 方法：在體外培養(yǎng)人鼻咽癌HNE-1細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組分別給予0.1 moi、l moi、10 moi、100 moi的VSV處理和設(shè)立空白對照。分別在24小時(shí)和48小時(shí)于倒置顯微鏡下觀察各組腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)的細(xì)胞病變，MTT實(shí)驗(yàn)分析VSV處理導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞殺傷作用，HO 33258染色熒光顯微鏡檢測VSV誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞凋亡。 結(jié)果：在體外培養(yǎng)人鼻咽癌HNE-1細(xì)