補腎調(diào)氣法治療腦出血后抑郁的機理研究.pdf

1、目的：根據(jù)卒中后抑郁(PSD)的內(nèi)源性機制學說和反應性機制學說，建立腦出血后抑郁動物模型，觀察腦出血后抑郁大鼠動物腦內(nèi)單胺遞質(zhì)及單胺神經(jīng)受體表達的變化，探討腦出血后抑郁的發(fā)病機理。提出腦出血后抑郁的病機為。腎虛氣郁、痰瘀互結(jié)、腦髓失養(yǎng)，探討以補腎調(diào)氣為治法的方藥頤腦解郁對腦出血后抑郁的治療機理。 方法：1．選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open—Field行為學評分隨機分為正常組、出血組、抑郁組、模型組。正常組予正常食水。出血組，膠

2、原酶誘導腦出血。抑郁組與模型組一同接受21天的不可預知性的慢性應激刺激合并孤養(yǎng)。模型組，膠原酶誘導腦出血，術(shù)后7天開始21天的慢性應激刺激合并孤養(yǎng)。應激結(jié)束后進行行為學測定(糖水消耗量、Open—Field測定)，后用免疫組化法測定單胺神經(jīng)遞質(zhì)受體的表達，對腦邊緣系統(tǒng)進行圖像分析，觀察所測定指標陽性表達的光密度值和面積值。 2．選擇雄性Wistar大鼠經(jīng)Open—Field行為學評分隨機分為正常組、模型組、西藥組和中藥組。正常組

3、常規(guī)飼養(yǎng)，模型組、中藥組和西藥組予膠原酶誘導腦出血手術(shù)，術(shù)后7天開始予21天的慢性不可預知的溫和應激，應激結(jié)束中藥組予頤腦解郁方灌胃每日1次，共6周；西藥組灌胃氟西汀，每日1次，共6周。灌胃結(jié)束后進行行為學測定，后用免疫組化法測定腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)受體表達及應用高壓液相電化學法測定腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)含量，對腦邊緣系統(tǒng)進行圖像分析，觀察所測定指標陽性表達的光密度值和面積值。 結(jié)果：1．腦出血大鼠在各周與正常組大鼠無明顯差異；抑郁組在第

4、15天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組比有明顯差異(P<0.05)，在第21天后，蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P<0.01)；模型組大鼠蔗糖水的消耗量在第15天和第21天后蔗糖水的消耗量下降，與正常組相比有顯著差異(P<0.01)。敞箱試驗結(jié)果，模型組、抑郁組、出血組水平活動和垂直活動次數(shù)較正常組相比，均有顯著性差異(P<0.01)。 5-TH<,1Λ>R測定：出血組大鼠扣帶皮質(zhì)、杏仁皮質(zhì)和下丘腦陽性細胞光密度較正

5、常組增高(P<0.05)；抑郁組大鼠陽性細胞在扣帶皮質(zhì)減少，面密度降低(P<0.05)，杏仁皮質(zhì)、下丘腦表達顏色變深，光密度較正常組增高(P<0.05)；模型組大鼠在扣帶皮質(zhì)陽性細胞數(shù)減少，面密度降低(P<0.05)，杏仁皮質(zhì)、下丘腦表達顏色變深，光密度較正常增高(P<0.05，P<0.01)。D<,2>DR測定：與正常組比較，腦出血組大鼠海馬CA1區(qū)D<,2>DR陽性細胞表達減弱，光密度和面密度均較降低(P<0.05)；抑郁組大鼠梨狀

6、皮層陽性細胞表達增多，面密度增高(P<0.01)，但陽性細胞顏色變淺，光密度降低(P<0.01)，海馬CA3陽性細胞染色變淺，光密度降低(P<0.05)；模型組大鼠海馬CA1、CA3、扣帶皮質(zhì)內(nèi)陽性細胞表達明顯減弱，陽性細胞數(shù)量也明顯減少，細胞排列稀疏，扣帶皮質(zhì)光密度和杏仁皮質(zhì)光密度、面密度較降低(P<0.05)，海馬CA1光密度和CA3面密度降低(P<0.05)。 2．中藥組和西藥組蔗糖水消耗量較模型組增加(P<0.05)。中

7、藥組和西藥組大鼠水平走格數(shù)與模型組比較有顯著增加(P<0.05)。 大腦前皮質(zhì)單胺遞質(zhì)含量：模型組5-HT含量低于正常組(P<0.01)，西藥組、中藥組5-HT含量較模型組顯著增加(P<0.05)；模型組前皮質(zhì)NE含量低于正常組(P<0.05)，中藥、西藥組較模型組NE顯著增加(P<0.05)；模型組前皮質(zhì)5-HIAA含量低于正常組(P<0.05)，西藥組、中藥組較模型組5-HIAA含量有增高趨勢，但無統(tǒng)計學差異。左側(cè)海馬單胺遞

8、質(zhì)含量：模型組5-HT、NE和DA含量低于正常組(P<0.01；P<0.05)；中藥組5-HT、DA、NE含量高于模型組(P<0.05)；西藥組5-HT含量高于模型組(P<0.05)3.5-TH<,1Λ>R測定：模型組大鼠杏仁皮質(zhì)、下丘腦5-HT<,1Λ>R陽性細胞表達較正常光密度有增加(P<0.05)，中藥組扣帶皮質(zhì)和CA3區(qū)陽性細胞面密度較模型組降低；西藥組杏仁皮質(zhì)、下丘腦和CA3區(qū)光密度和CA3面密度較模型組降低(P<0.05)。

9、D<,2>DR測定：與正常組比較，模型組大鼠扣帶皮質(zhì)、海馬CA1區(qū)D<,2>DR陽性細胞表達顏色變深，光密度升高(P<0.05)：杏仁核、海馬CA1、CA3區(qū)D<,2>DR陽性細胞表達面積減少(P<0.05);梨狀皮質(zhì)、CA3區(qū)D<,2>DR陽性細胞表達顏色變淺，光密度降低(P<0.05)。與模型組比較，西藥組扣帶皮質(zhì)和海馬CA1陽性細胞表達變淺(P<0.05)：杏仁核、海馬CA3區(qū)染色加深，光密度增加(P<0.05)，但同時表達面積下

10、降(P<0.05)。與模型組比較，中藥組扣帶皮質(zhì)和海馬CA1陽性細胞光密度降低(P<0.05)，梨狀皮質(zhì)、杏仁核和海馬CA3染色加深，光密度增高(P<0.05)：但在海馬CA1區(qū)表達面積減少(P<0.05)。 結(jié)論：采用膠原酶誘導腦出血模型復合慢性不可預知溫和應激和孤養(yǎng)法可建立腦出血后抑郁大鼠模型該模型，模型動物在行為學上表現(xiàn)出興趣和快感缺乏活動性減少模擬了卒中后抑郁的主要癥狀，與臨床腦出血后抑郁疾病癥狀存在一致性；同時該模型模