健腦安神針刺法治療腦卒中后抑郁作用機(jī)理的研究.pdf

1、目的：通過觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁(Post stroke depression，PSD)大鼠治療前后的體重、糖水消耗量及行為學(xué)、海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的病理形態(tài)及腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(Brain derived neurotrophic factor，BDNF)含量的影響，探討健腦安神針刺法治療腦卒中后抑郁的作用機(jī)理。 方法： 1．將Wistar大鼠隨機(jī)分為5組：空白組、模型組、針刺組、氟西汀組、針刺加氟西汀組。

2、 2．采用去大鼠腦皮層血管致腦缺血模型結(jié)合慢性不可預(yù)見的溫和性應(yīng)激(chronicunpredictable mild stress，CUMS)法及孤養(yǎng)法，建立“病、證結(jié)合”的動(dòng)物模型：腦卒中后抑郁大鼠模型。 3．分別在慢性不可預(yù)見性溫和刺激的第1天、第8天、第15天、第22天、第29天、測量各組大鼠的體重、糖水飲用量、曠野試驗(yàn)(Open-field test)得分，觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠的體重、糖水消耗量、

3、曠野試驗(yàn)得分的影響。 4．在實(shí)驗(yàn)的第36天處死全部實(shí)驗(yàn)大鼠，通過光鏡觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠海馬CAl區(qū)形態(tài)學(xué)的影響。 5．通過電鏡及光鏡觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠海馬CAl區(qū)超微結(jié)構(gòu)的影響。 6．采用免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry，ICH)檢測大鼠海馬CAl區(qū)的BDNF蛋白表達(dá)水平，觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠腦內(nèi)BDNF表達(dá)的影響。 結(jié)果：

4、 1．觀察健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠體重、糖水消耗量及行為學(xué)的影響：模型組大鼠體重減輕，糖水消耗量與空白組相比明顯減少，有極顯著性差異(P<0.01)。曠野試驗(yàn)中模型組大鼠水平及垂直得分均小于空白組，有極顯著性差異(P<0.01)。針刺可以增加大鼠體重，與氟西汀、針刺加氟西汀比較療效無差異，但氟西汀起效較快；針刺可以增加大鼠糖水消耗量，與氟西汀、針刺加氟西汀比較，在一定階段氟西汀療效最好，隨治療時(shí)間延長，療效相當(dāng)；針刺可以增加大

5、鼠水平運(yùn)動(dòng)水平，起效較快，與其他兩種干預(yù)方法比較，在一定階段療效相當(dāng)，隨治療時(shí)間延長，氟西汀組療效較好；針刺可以增加大鼠垂直運(yùn)動(dòng)水平，與其他兩種干預(yù)方法比較，療效最為突出。 2．健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠海馬CAl區(qū)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響：光鏡、電鏡下可見空白組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞排列整齊緊密，形念完整，胞漿豐富，胞核飽滿，核仁清晰。模型組細(xì)胞排列紊亂疏松，較多細(xì)胞核脫失，細(xì)胞核可見淡染、腫脹、碎裂、呈空泡化和核固縮，細(xì)胞數(shù)目明

6、顯少于空白組。各治療組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞電鏡下觀察較模型組改善明顯，核內(nèi)染色質(zhì)較均勻，核膜較模型組完整，線粒體嵴清晰,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有大量核糖體附著，線粒體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器數(shù)目增加。針刺組優(yōu)于氟西汀組，療效最好。氟西汀組與針刺加氟西汀組比較無差異。 3．健腦安神針刺法對腦卒中后抑郁大鼠海馬CAl區(qū)BDNF含量的影響：各組海馬CAl區(qū)均可見到BDNF免疫陽性細(xì)胞。空白組可見較多BDNF免疫反應(yīng)陽性顆粒，成棕黃色；模型組陽性

7、顆粒數(shù)目明顯減少，著色淺淡；經(jīng)治療各組BDNF陽性顆粒數(shù)目明顯增多，著色加深。針刺組明顯增加海馬CAl面積比(％)、降低平均灰度值，但表達(dá)水平較氟西汀差，與針刺加氟西汀組比較無差異。 結(jié)論： 1．采用去大鼠腦皮層血管致腦缺血模型結(jié)合慢性不可預(yù)見的溫和性應(yīng)激(chronic unpredictable mild stress，CUMS)法及孤養(yǎng)法的復(fù)合造模方法可成功制備腦卒中后抑郁動(dòng)物模型。模型主要表現(xiàn)為糖水消耗量減少，水

8、平運(yùn)動(dòng)、垂直運(yùn)動(dòng)水平降低。該模型可應(yīng)用于研究PSD的病理機(jī)制或新的治療策略。海馬BDNF含量下降可能是PSD發(fā)病機(jī)理。 2．本研究所測定各項(xiàng)指標(biāo)的結(jié)果顯示：健腦安神針刺法可以通過調(diào)節(jié)體重、行為學(xué)、改善海馬CAl區(qū)的病理形態(tài)，增加海馬CAl區(qū)BDNF的含量來改善腦卒中后抑郁大鼠的抑郁癥狀，且其療效與氟西汀相當(dāng)。這可能是健腦安神針刺法治療PSD的療效作用機(jī)理之一。 3．健腦安神針刺法是防治腦卒中后抑郁的有效治療方法，值得進(jìn)一