腦缺血大鼠海馬星形膠質(zhì)纖維酸蛋白與高遷移率族蛋白表達(dá)變化及其意義.pdf

1、目的：
　　 研究大鼠局灶性腦缺血再灌注后，星形膠質(zhì)纖維酸蛋白（GFAP）與高遷移率族蛋白（HMGB1）在海馬CA1區(qū)表達(dá)變化，探討GFAP與HMGB1二者之間是否相關(guān)。
　　 方法：
　　 1、實(shí)驗(yàn)動物：體重250～310g普通級成年雄性SD大鼠60只（安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供）。
　　 2、實(shí)驗(yàn)動物分組：60只雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組及缺血組，兩組再分為1 d，3 d，7 d，14 d，28

2、d ,5個亞組，每個亞組6只大鼠。
　　 3、動物模型的制備：參照Longa[1]線栓法制作大鼠大腦中動脈阻塞再灌注（MCAO/R）模型。采用大腦中動脈栓塞2h制備SD大鼠腦缺血模型；假手術(shù)組不插入線栓，余手術(shù)過程同缺血組。
　　 4、蘇木素-伊紅染色：HE染色觀察海馬CA1區(qū)的病理變化。
　　 5、免疫組化：用免疫組化法觀察在海馬CA1區(qū)域GFAP和HMGB1在腦缺血1 d，3 d，7 d，14 d，28 d后

3、表達(dá)情況。
　　 6、免疫熒光雙標(biāo)：用免疫熒光雙標(biāo)結(jié)合激光共聚焦分析腦缺血后在海馬CA1區(qū)域GFAP和HMGB1時程表達(dá)變化。
　　 7、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，兩組均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，多組均數(shù)比較采用單因素方差分析。以α=0.05作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示。
　　 結(jié)果：
　　 1．對照組大部分細(xì)胞形態(tài)正常未發(fā)現(xiàn)明顯病理變化，缺血再灌注組隨著時間變化

4、可見膠質(zhì)細(xì)胞增生、肥大，間質(zhì)水腫，細(xì)胞水腫，神經(jīng)元細(xì)胞壞死、核萎縮，在阻塞區(qū)域，炎性細(xì)胞明顯增加。
　　 2．與假手術(shù)組比較，腦缺血組各時間點(diǎn)腦組織GFAP、HMGB1表達(dá)均顯著增加（P<0.05）。
　　 3．腦缺血組中再灌注7 d時GFAP表達(dá)最多，再灌注14 d時HMGB1表達(dá)最多（P<0.05）。
　　 4．腦缺血組大鼠腦組織GFAP與HMGB1表達(dá)成正相關(guān)且在海馬CA1區(qū)存有共定位細(xì)胞（r1=0.499