miR-17對(duì)p21表達(dá)的抑制作用在大腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中的調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、中圖分類號(hào)UDC610博士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q耋33密級(jí)公玨miR17對(duì)p21表達(dá)的抑制作用在大腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中的調(diào)控機(jī)制的研究AstudyabouttheregulatorymechanismincorticaldevelopmentbythesilencingeffectofmiR17onp21作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：副指導(dǎo)教師：陳亞瑟臨床醫(yī)學(xué)神經(jīng)病學(xué)湘雅醫(yī)院唐北沙教授孫濤教授答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)2

2、014年5月miR17對(duì)p21表達(dá)的抑制作用在大腦皮質(zhì)發(fā)育中發(fā)揮調(diào)控作用機(jī)制的研究摘要背景：神經(jīng)祖細(xì)胞數(shù)目的擴(kuò)增在大腦皮質(zhì)的發(fā)育過(guò)程中對(duì)控制大腦的大小起著至關(guān)重要的作用，神經(jīng)祖細(xì)胞的增殖如果出現(xiàn)障礙的話會(huì)導(dǎo)致大腦皮質(zhì)發(fā)育不全，在臨床上表現(xiàn)為小腦畸形(microencephaly)的癥狀。神經(jīng)祖細(xì)胞胞增殖受到各種細(xì)胞周期調(diào)控因子的調(diào)控。本文將要闡述的調(diào)控因子p21(也被稱為Cdknla或者Cipl)，是一種依賴細(xì)胞周期蛋白的激酶的抑制劑。

3、它在小鼠大腦皮質(zhì)發(fā)育的過(guò)程中可抑制放射膠質(zhì)細(xì)胞(radialglialcells，RGCs)和中間祖細(xì)胞(intermediateprogenitors，IPs)的增殖。因此，在正常大腦皮質(zhì)的發(fā)育初期，p21基因的表達(dá)必須被抑制，否則會(huì)使得RGCs和IPs的數(shù)目不足從而導(dǎo)致大腦皮質(zhì)發(fā)育不全。曾有研究發(fā)現(xiàn)一種小分子RNAmiR17在癌變的過(guò)程中可靶向抑制p21基因的表達(dá)，但是它在大腦皮質(zhì)的發(fā)育過(guò)程中扮演什么樣的角色仍有待探討。本研究旨在揭

4、示在大腦皮質(zhì)發(fā)育過(guò)程中p21基因表達(dá)水平由miR17調(diào)控的分子機(jī)制，同時(shí)也試圖從小分子RNA表達(dá)異常的角度來(lái)解釋小腦畸形的一種可能發(fā)病機(jī)制。方法：1我們利用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)測(cè)定E125、E135、E145、E155、E175以及PO小鼠的背側(cè)大腦皮質(zhì)中miR17和p2l的表達(dá)水平的變化趨勢(shì)；2我們將miR17和p21基因的3’UTR共轉(zhuǎn)染到Neur02a細(xì)胞中進(jìn)行熒光素酶實(shí)驗(yàn)以證實(shí)miR17在體外對(duì)p21基因的靶向抑制作用；3我