GBE對(duì)SD大鼠原代肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡及膠原合成的影響.pdf

1、目的：
　　 探討SD大鼠原代肝星狀細(xì)胞（Hepatic Stellate Cell，HSC）體外培養(yǎng)中，不同濃度的銀杏葉提取物對(duì)其增殖、凋亡及膠原合成的影響
　　 方法：
　　 1.采用改良的膠原酶消化法原位分離SD大鼠HSC。
　　 2.0.4％臺(tái)盤藍(lán)染色計(jì)算產(chǎn)量及存活率、顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、結(jié)蛋白免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定分離的HSC。
　　 3.實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、GBE各濃度處理組（0、1

2、、10、100、500μg/ml），分別用MTT法觀察GBE對(duì)HSC的增殖影響、ANNEXIN V FITC/PI雙染、流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)HSC凋亡情況、ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞的膠原合成。
　　 結(jié)果：
　　 1.原代分離的HSC得率為2.5×107/每只大鼠，純度大于95％，活率大于90％。
　　 2.GBE各濃度處理組：1μg/mlGBE抑制率為7.83％，10μg/mlGBE抑制率為21.5％，100μg/

3、mlGBE抑制率為32.4％，500μg/mlGBE抑制率44.8％，隨GBE處理濃度增加，對(duì)HSC增殖抑制程度增加，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。
　　 3.ANNEXIN V FITC/PI雙染顯示隨著GBE濃度的增加，HSC凋亡率逐漸增加（P<0.01）。
　　 4.ELISA方法檢測(cè)細(xì)胞的膠原合成顯示，隨GBE濃度的增加，Ⅳ型膠原合成的含量逐漸降低，與對(duì)照組之間存在明顯差異（P<0.05），透明質(zhì)酸（Hyalur