油酸對(duì)肺損傷體外模型SP-B表達(dá)的初步研究.pdf

1、目的:檢測(cè)油酸刺激后 A549細(xì)胞上清液 TNF-ɑ濃度,了解細(xì)胞損傷機(jī)制;觀察不同濃度油酸刺激下A549細(xì)胞中SP-B的表達(dá)與分布變化,探討油酸與肺損傷的關(guān)系,建立油酸致肺損傷體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?為臨床預(yù)防和治療肺損傷提供新的思路和實(shí)驗(yàn)方法。
　　方法:1.將 A549細(xì)胞分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組分別用不同終濃度的油酸處理24h。2.CCK-8法檢測(cè)油酸對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響,倒置電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。3.免疫細(xì)胞化學(xué)法檢

2、測(cè)SP-B在各組中的表達(dá)和變化。4.采用ELISA法檢測(cè)油酸刺激下A549細(xì)胞上清液中TNF-ɑ濃度變化。
　　結(jié)果:1.CCK-8法檢測(cè)濃度越高的油酸干預(yù)A549細(xì)胞24小時(shí)后能直接抑制A549細(xì)胞增殖,A549細(xì)胞各實(shí)驗(yàn)組在油酸刺激24小時(shí)后與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)表現(xiàn):對(duì)照組中A549細(xì)胞為多角形、細(xì)胞質(zhì)豐富,突起明顯,貼壁狀況良好,細(xì)胞間融合成鋪路石狀。油酸處理組(濃度:300μmol/L

3、)A549細(xì)胞腫大變圓,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)少量大小不等顆粒;油酸處理組(濃度:400μmol/L) A549細(xì)胞胞體變圓明顯,體積縮小,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量大小不等的顆粒;油酸處理組(濃度:500μmol/L)A549細(xì)胞器崩解,碎裂。3.ELISA法實(shí)驗(yàn)檢測(cè)顯示各實(shí)驗(yàn)組中細(xì)胞上清液TNF-α濃度與對(duì)照組變化不大,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果:油酸處理組(濃度:300μmol/L)和油酸處理組(濃度:400μmol/L)表達(dá)分別為0.1