FGR大鼠胎肺SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2的變化.pdf

1、第一章FGR大鼠模型的建立
　　目的：用不同的方法建立FGR動物模型,比較其FGR發(fā)生率。
　　方法：1.動物模型的制備及實驗分組分別用低氧法和低蛋白法建立大鼠FGR模型,將妊娠大鼠隨機分為三組:低氧組、低蛋白組和正常對照組,于妊娠21天對妊娠鼠行剖宮產(chǎn)術(shù),比較三組胎兒的存活率以及FGR的發(fā)生率。2.一般情況記錄記錄孕鼠、胎鼠的體重、胎鼠個數(shù)、胎盤重量等。3.統(tǒng)計學(xué)分析實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用獨立樣本t檢驗。

2、p<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：低氧法、低蛋白法和正常對照組三組的胎鼠平均體重分別為2.7468±0.5549g,2.8891±0.4363g,3.9775±0.8473g,以出生體重低于正常對照組第10百分位數(shù)為FGR的判斷標(biāo)準(zhǔn),孕鼠產(chǎn)出FGR胎鼠的發(fā)生率分別為54.4％、37.0%、5.6%。
　　結(jié)論：低氧法和低蛋白均可成功的建立FGR大鼠模型,尤以前者的成功率更高,且結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。

3、r>　　第二章FGR大鼠胎肺中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2的變化
　　目的：探討FGR大鼠胎肺中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2的表達的變化,并分析各因素間的相互關(guān)系。
　　方法：從光鏡和電鏡下比較胎鼠肺臟的病理學(xué)變化;用免疫組化的方法比較胎肺中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2的變化;用RT-PCR的方法比較胎肺中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2mRNA表達的變化;用wes

4、ternblot方法比較胎肺中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL2蛋白表達的變化,并對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：1.胎肺HE染色正常對照組肺泡結(jié)構(gòu)規(guī)則,肺泡間隔分布均勻,肺泡壁較薄,肺泡腔未見明顯滲出液。而低蛋白組與低氧組均可見肺泡結(jié)構(gòu)不規(guī)則,排列紊亂,肺泡壁較厚,肺泡腔內(nèi)可見明顯滲出。2.電鏡比較與正常組相比,低氧組和低蛋白組胎肺肺泡II型上皮細胞中板層小體明顯減少,Ⅱ型肺泡上皮細胞表面微絨毛粗短,形態(tài)不規(guī)則,

5、細胞漿內(nèi)可見大量未完全成熟的板層小體,結(jié)構(gòu)致密,染色較深,層次結(jié)構(gòu)尚未完全形成。細胞內(nèi)線粒體明顯增多,部分線粒體可見明顯腫脹,擴張及空泡化。毛細血管基底膜斷裂不連續(xù),薄厚不均勻。3.免疫組化免疫組化切片可見低氧組和低蛋白組肺泡II型上皮細胞中SP-B、SP-C及TTF-1和PLAGL2表達均不同程度地減少。4.RT-PCR和western-blot胎肺中表面活性蛋白SP-B和SP-C的mRNA、蛋白表達均減少(P<0.05),TTF-1