轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的誘發(fā)因素及其與認(rèn)知功能障礙關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　阿爾茨海默?。ˋlzheimer’sdisease，AD）是在老年期發(fā)生的神經(jīng)系統(tǒng)退行性變性疾病，是癡呆最常見的病因，臨床上以隱襲起病、進(jìn)行性智能衰退、認(rèn)知功能障礙、多伴有人格改變等為主要特征。迄今AD發(fā)病機(jī)制尚不完全闡明。目前研究認(rèn)為β-淀粉樣蛋白（amyloid-betaprotein，Aβ）聚集和淀粉樣斑塊（老年斑）形成及其神經(jīng)毒性作用是AD發(fā)病和發(fā)展的重要病理學(xué)基礎(chǔ)。近年來有研究表明，Aβ介導(dǎo)的炎癥反

2、應(yīng)參與了AD病理過程，可能在AD發(fā)病機(jī)制中具有重要作用。然而，AD腦內(nèi)炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的誘發(fā)因素及其與AD認(rèn)知障礙的關(guān)系尚未闡明。本項(xiàng)研究應(yīng)用轉(zhuǎn)人β-淀粉樣前體蛋白/早老素-1（APP/PS1）基因AD小鼠及相匹配的正常小鼠，通過觀察3月齡APP/PS1小鼠（腦內(nèi)尚無淀粉樣斑塊）和12月齡APP/PS1小鼠（腦內(nèi)已有淀粉樣斑塊沉積）學(xué)習(xí)記憶功能和炎癥反應(yīng)的變化，試圖明確AD腦內(nèi)炎癥反應(yīng)產(chǎn)生的誘發(fā)因素及其在AD發(fā)生和發(fā)展過程中的重要作用，為抗

3、炎藥物在防治AD中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)方法：
　　選用雌性3月、12月齡APP/PS1小鼠及匹配的正常野生型（WT）小鼠。應(yīng)用Morris水迷宮分別評定APP/PS1小鼠及相應(yīng)WT小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能；應(yīng)用免疫組織化學(xué)法觀察各組小鼠腦內(nèi)淀粉樣斑塊、炎性細(xì)胞的變化；應(yīng)用ELISA法觀察各組小鼠腦內(nèi)炎性因子（IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2）的變化；觀察APP/PS1小鼠腦組織中炎性因子（IL-1β、IL-6

4、、TNFα、PGE2）含量與其學(xué)習(xí)記憶功能的相關(guān)性。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1．3月齡APP/PS1小鼠腦組織中尚無淀粉樣斑塊沉積，未見明顯激活的星型膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞，炎性因子（IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2）的含量與WT小鼠相比無顯著差異（P>0.05）。
　　2．12月齡APP/PS1小鼠腦組織中有大量淀粉樣斑塊沉積，并伴有大量激活的星型膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞，炎性因子（IL-1β、IL-6、TNFα、P

5、GE2）的含量顯著高于同齡WT小鼠和3月齡APP/PS1小鼠（P<0.05）。
　　3．3月齡APP/PS1小鼠空間學(xué)習(xí)功能較WT小鼠無顯著差異（P>0.05），而其空間記憶功能較WT小鼠顯著下降（P<0.05）；相關(guān)性分析表明，3月齡APP/PS1小鼠腦組織中炎性因子（IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2）的含量與其空間記憶功能均無顯著相關(guān)性（P>0.05）。
　　4．12月齡APP/PS1小鼠空間學(xué)習(xí)、記憶功能較WT

6、小鼠均顯著下降（P<0.05）；相關(guān)性分析表明，12月齡APP/PS1小鼠腦組織中炎性因子（IL-1β、IL-6、TNFα、PGE2）的含量與其空間學(xué)習(xí)、記憶障礙均有顯著相關(guān)性（P<0.05）。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
　　1．淀粉樣斑塊形成之前（3月齡APP/PS1小鼠），腦組織中無明確的炎癥反應(yīng)；而淀粉樣斑塊沉積之后（12月齡APP/PS1小鼠），腦組織中存在顯著的炎癥反應(yīng)，提示AD腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的產(chǎn)生與淀粉樣斑塊形成密切相關(guān)，A

7、β沉積可能是導(dǎo)致腦內(nèi)炎癥反應(yīng)的直接誘發(fā)因素。
　　2．在淀粉樣斑塊形成之前，3月齡APP/PS1小鼠雖已有空間記憶功能障礙，但腦內(nèi)無明確炎癥反應(yīng)且炎性因子與其空間記憶功能障礙無相關(guān)性，提示炎癥反應(yīng)在AD早期記憶障礙發(fā)生過程中無直接作用。
　　3．在淀粉樣斑塊形成之后，12月齡APP/PS1小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)顯著增加且與其空間學(xué)習(xí)、記憶功能障礙密切相關(guān)，提示炎癥反應(yīng)在AD學(xué)習(xí)記憶障礙進(jìn)展過程中具有重要作用。
　　綜上，研究