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文檔簡介
1、目的:
探討類固醇生成因子-1(Steroidogenic factor-1 SF-1)在早孕期小鼠子宮內膜的表達規(guī)律及SF-1的表達對子宮內膜基質細胞增殖的影響及其調控機制。
方法:
通過成功構建小鼠正常妊娠,假孕,人工誘導蛻膜化的模型并收集材料,應用這些材料進行免疫組織化學,Western Blot方法檢測小鼠在第1,4,5,6,8天及誘導蛻膜化組和對照組子宮內膜的SF-1的表達情況。然后分離原代小鼠子
2、宮內膜基質細胞并進行了鑒定;利用Lipofectamine2000轉染pCMV6-SF-1的表達質粒、PI3K信號通路抑制劑LY294002和mTOR信號通路抑制劑Rapamycin等不同方式處理小鼠原代基質細胞。
結果:
在正常妊娠小鼠子宮內膜中,免疫組織化學和Western Blot結果顯示SF-1在第5,6,8天著床點表達高于著床旁;在假孕小鼠子宮內膜中,SF-1在PD1-PD8的表達沒有明顯差異;在人工誘導蛻
3、膜化中,小鼠子宮內膜SF-1的表達在蛻膜化組里明顯高于對照組。通過Western Blot檢測結果顯示過表達SF-1后可顯著誘導增殖相關基因 PCNA及PH3的蛋白表達及細胞增殖;EdU結果也顯示過表達SF-1后可顯著誘導增殖;同時Western Blot檢測PI3K-AKT-mTOR信號通路相關蛋白的表達,結果表明PI3K-AKT-mTOR信號通路參與了SF-1過表達后引起的細胞增殖。
結論:
1.SF-1可以誘導
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