急性心肌缺血誘發(fā)大鼠背根神經(jīng)節(jié)、脊髓及外周臟器孤啡肽（OFQ）表達(dá)的變化及藥物干預(yù)研究.pdf

1、本文研究目的：主要觀察急性心肌缺血作為傷害性刺激誘發(fā)心肌損傷時(shí)，孤啡肽在背根神經(jīng)節(jié)、脊髓、心肌和小腸組織內(nèi)的表達(dá)變化，并觀察預(yù)先給予嗎啡、艾司洛爾、羅哌卡因等藥物干預(yù)的效應(yīng)。探討孤啡肽在急性心肌缺血誘發(fā)神經(jīng)源性反應(yīng)中的作用及其機(jī)制。 研究方法： 第一部分：急性心肌缺血后OFQ的表達(dá)變化實(shí)驗(yàn)選用雄性SD大鼠隨機(jī)分為三組： (1)空白對(duì)照組(Control group，C組)，麻醉后直接取材； (2)假手術(shù)組(Sha

2、m group， S組)，只開(kāi)胸暴露心臟不結(jié)扎冠脈；(3)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Coronarv arterv occlusion group，CAO組)，單純?cè)]冠狀動(dòng)脈左前降支。其中，Sham組和CAO組又分為四個(gè)時(shí)點(diǎn)的亞組：0.5h組、1h組、3h組、6h組，每組大鼠均為6只。采用免疫組化觀察并分析結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈不同時(shí)點(diǎn)背根神經(jīng)節(jié)、脊髓、心肌和小腸等組織內(nèi)OFQ的表達(dá)變化情況；應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)比分析不同時(shí)點(diǎn)脊髓和背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)p

3、reproOFQ mRNA的表達(dá)水平。 第二部分：硬膜外及靜脈預(yù)先給藥后OFQ的表達(dá)變化的研究根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分別選取CAO后OFQ表達(dá)最強(qiáng)的時(shí)點(diǎn)進(jìn)行藥物干預(yù)研究。采用雄性SD大鼠隨機(jī)分為六組：(1)假手術(shù)組(Sham group，S組)；(2)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Coronary artery occlusion group，CAO組)；(3)青爭(zhēng)脈注射嗎啡組(Intravenous injection Morphine g

4、roup，I-M組)；(4)靜脈注射艾司洛爾組(Intravenous injection Esmolol group，I-E組)；(5)硬膜外羅哌卡因預(yù)處理組(Epidural Ropivacaine group，E-R組)；(6)硬膜外嗎啡預(yù)處理組(Epidural Morphine group，E-M組)。各藥物干預(yù)組分別在結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前15min經(jīng)尾靜脈給予嗎啡1.25mg．kg<'-1>、艾司洛爾3.0mg．kg<'-1>；

5、經(jīng)硬膜外給予嗎啡60μg．kg<'-1>、1％羅哌卡因120μg．kg<'-1>。采用免疫組化、ELISA和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等技術(shù)從蛋白和mRNA水平對(duì)比分析各藥物的干預(yù)效應(yīng)。 研究結(jié)果：(1)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支后大鼠脊髓、背根神經(jīng)節(jié)、心肌和小腸組織內(nèi)OFQ水平較C組、S組顯著升高(P<0.05)，心肌、小腸內(nèi)OFQ的表達(dá)在CAO3h達(dá)高峰(P<0.01)，心肌缺血區(qū)OFQ水平與非缺血區(qū)心肌比較無(wú)顯著性差異；背根神經(jīng)節(jié)及脊髓

6、OFQ在CAP1h達(dá)高峰(P<0.01)，脊髓背角和腹角OFQ水平比較無(wú)顯著性差異；各藥物干預(yù)組OFQ水平明顯低于CAO組(P<0.05)； (2)在脊髓和背根神經(jīng)節(jié)，CAO各組preproOFQ mRNA的表達(dá)水平均較較C組、S組增高(P<0.05)，CAO1h組表達(dá)最為顯著(P<0.01)；各藥物干預(yù)組明顯低于CAO組(P<0.05)，各藥物干預(yù)組之間差異無(wú)顯著性，與蛋白水平變化一致。 研究結(jié)論： (1)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支

7、后大鼠背根神經(jīng)節(jié)、脊髓、心肌及小腸OFQ水平明顯升高，提示：急性心肌缺血作為一種傷害性刺激可能誘發(fā)、激活了機(jī)體神經(jīng)源性反應(yīng)機(jī)制；OFQ可能在這種神經(jīng)源性機(jī)制中發(fā)揮了作用； (2)心肌缺血刺激可誘發(fā)心肌組織和遠(yuǎn)位器官內(nèi)OFQ變化；(3)嗎啡、艾司洛爾預(yù)先靜脈給藥、硬膜外給予嗎啡或羅哌卡因均可顯著降低結(jié)扎冠狀動(dòng)脈誘發(fā)的大鼠背根神經(jīng)節(jié)、脊髓、心肌及小腸OFQ的表達(dá)。提示：神經(jīng)機(jī)制參與介導(dǎo)心肌缺血反應(yīng)；體內(nèi)阿片類、腎上腺素能機(jī)制和脊髓內(nèi)阿片類機(jī)