結(jié)扎冠狀動(dòng)脈誘發(fā)TNF-α和P物質(zhì)在大鼠心肌組織、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓的表達(dá)及藥物干預(yù)效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：觀察結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈不同時(shí)點(diǎn)心肌、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓內(nèi)TNF-α和SP的表達(dá)變化及嗎啡、曲馬多、酚妥拉明、艾司洛爾、阿托品預(yù)先給藥的干預(yù)效應(yīng)，探討(1)TNF-α和SP在心肌缺血傷害性刺激誘發(fā)機(jī)體神經(jīng)源性反應(yīng)機(jī)制中的作用及機(jī)理；(2)局部心肌急性缺血誘發(fā)整體心肌損傷的機(jī)制；(3)痛覺干預(yù)在缺血心肌保護(hù)中的作用及機(jī)制。 方法：第一部分：TNF-α和SP的表達(dá)變化實(shí)驗(yàn)選用雄性SD大鼠隨機(jī)分為三組：(1)動(dòng)物對照組(Control

2、group，C組)，麻醉后直接取材；(2)手術(shù)對照組(Shamgroup，S組)，只開胸不結(jié)扎冠脈；(3)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO組)，單純扎閉冠狀動(dòng)脈左前降支。其中，Sham組和CAO組又分為八個(gè)時(shí)點(diǎn)的亞組：0.5h組、1h組、3h組、6h組、1day組、2day組、3day組、7day組。采用免疫組化和ELISA技術(shù)觀察結(jié)扎大鼠冠狀動(dòng)脈不同時(shí)點(diǎn)心肌、背根神經(jīng)節(jié)和脊髓內(nèi)TNF-α

3、和SP的表達(dá)變化； 第二部分：TNF-a和SP的表達(dá)變化的干預(yù)研究根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分別選取CAO后TNF-α和SP表達(dá)最強(qiáng)的時(shí)點(diǎn)進(jìn)行藥物干預(yù)研究。采用雄性SD大鼠隨機(jī)分為八組：(1)動(dòng)物對照組(Controlgroup，C組)；(2)手術(shù)對照組(Shamgroup，S組)；(3)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈組(Coronaryarteryocclusiongroup，CAO組)；(4)嗎啡預(yù)處理組(Morphinegroup，M組)；(5

4、)曲馬多預(yù)處理組(Tramadolgroup，T組)；(6)酚妥拉明預(yù)處理組(Rigitinegroup，R組)；(7)艾司洛爾預(yù)處理組(Esmololgroup，E組)；(8)阿托品預(yù)處理組(Atropinegroup，A組)。各藥物干預(yù)組分別在結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前15min經(jīng)尾靜脈給予嗎啡1.25mg.kg-1、曲馬多12.5mg.kg-1、酚妥拉明0.4mg.kg-1、艾司洛爾3.0mg.kg-1、阿托品1.0mg.kg-1。采用免疫

5、組化、ELISA和RealTimeRT-PCR技術(shù)觀察各藥物的干預(yù)效應(yīng)。 結(jié)果：(1)CAO后大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α水平較對照組顯著升高，心肌TNF-α在CAO1h達(dá)高峰，背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α在CAO0.5h達(dá)高峰；血運(yùn)阻斷區(qū)心肌TNF-α水平較非血運(yùn)阻斷區(qū)心肌顯著升高；背側(cè)和腹側(cè)脊髓TNF-α水平比較無顯著性差異；各藥物干預(yù)組TNF-α水平明顯低于CAO組，各藥物干預(yù)組之間TNF-α水平無顯著性差異。(2)

6、CAO后大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓SP水平較對照組顯著升高，心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓SP在CAO3h達(dá)高峰；血運(yùn)阻斷區(qū)心肌SP水平較非血運(yùn)阻斷區(qū)心肌顯著升高；背側(cè)脊髓SP水平較腹側(cè)脊髓顯著升高；各藥物干預(yù)組SP水平明顯低于CAO組，各藥物干預(yù)組之間SP水平無顯著性差異。(3)在心肌組織和背根神經(jīng)節(jié)，CAO組TNF-αmRNA和SPmRNA的表達(dá)水平均較對照組顯著升高(P＜0.05)，各藥物干預(yù)組明顯低于CAO組(P＜0.05)，各藥物干預(yù)

7、組之間無顯著性差異。與蛋白水平變化一致；但在脊髓，CAO組TNF-αmRNA和SPmRNA的表達(dá)水平與對照組、各藥物干預(yù)組比較無顯著性差異。 結(jié)論：(1)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈可誘發(fā)大鼠心肌、背根神經(jīng)節(jié)及脊髓TNF-α和SP水平明顯升高，提示：急性心肌缺血作為一種傷害性刺激可能誘發(fā)、激活了機(jī)體神經(jīng)源性反應(yīng)機(jī)制；TNF-α和SP可能在這種神經(jīng)源性機(jī)制中發(fā)揮了作用；神經(jīng)源性機(jī)制可能參與了急性心肌缺血傷害性刺激誘發(fā)的心肌損傷及其調(diào)制的病理學(xué)過程