不同培養(yǎng)體系下小鼠4,8-細胞胚胎卵裂球發(fā)育質量與能力的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、卵裂球分離以及胚胎分割技術在農業(yè)、生物學及醫(yī)學等相關領域已得到廣泛應用,但是其培養(yǎng)體系仍有待于進一步完善。為了建立更為簡單而高效的卵裂球培養(yǎng)體系,提高其發(fā)育質量和能力,本實驗比較了培養(yǎng)液中不同成分對昆明小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球體外發(fā)育的影響,并采用體細胞共培養(yǎng)對小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)體系進行優(yōu)化,觀察了不同體細胞類型對小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球發(fā)育的影響。此外,還對中間受體培養(yǎng)體系在小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球發(fā)育上

2、的影響進行了研究。 對昆明小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球體外培養(yǎng)的研究結果表明,CZB是一種簡單而有效的昆明小鼠卵裂球體外培養(yǎng)體系。在本實驗條件下,未發(fā)現?;撬釋?,8-細胞單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細胞數的促進作用。這可能是由于本試驗使用的培養(yǎng)體系和小鼠品系不同造成的,同時也說明了并不是在所有實驗條件下添加?;撬岫寄芴岣咝∈笈咛サ捏w外發(fā)育能力。而實驗中也發(fā)現,在有葡萄糖存在時,小鼠4,8-細胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細

3、胞數均有顯著的提高。單一培養(yǎng)體系中小鼠4,8-細胞胚胎單個卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細胞數分別達到38%、12.43和20%、8.48。為了改善小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球的體外發(fā)育環(huán)境,在實驗中將小鼠4,8-細胞胚胎單卵裂球與豬輸卵管上皮和顆粒細胞進行共培養(yǎng),并比較了共培養(yǎng)和單一培養(yǎng)體系中單卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細胞數的差異。結果表明,豬輸卵管上皮細胞共培養(yǎng)體系中小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細胞數明顯高于單一培養(yǎng)體系,其囊胚發(fā)育率和囊

4、胚細胞數分別達到47%、17.57和26%、11.43,表明豬輸卵管上皮細胞共培養(yǎng)體系可顯著促進其體外發(fā)育的質量和潛力。而豬顆粒細胞共培養(yǎng)體系沒有顯著促進小鼠卵裂球的囊胚發(fā)育率和囊胚細胞數,同單一培養(yǎng)體系培養(yǎng)效果相比差異不顯著。 中間受體的實驗結果表明兔輸卵管能夠較好的促進卵裂球的發(fā)育質量,但是胚胎丟失嚴重,回收率低。而將小鼠卵裂球移入同種發(fā)情母鼠的子宮培養(yǎng),其胚胎的回收率仍然很低。這些研究結果說明其主要原因可能是自然存在的體內

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