黃芩苷促進(jìn)體外培養(yǎng)小鼠胚胎發(fā)育及其機(jī)制的研究.pdf

1、黃芩苷(baicalin)是從黃芩根部分離出來的主要活性成分之一，安胎作用顯著。本試驗(yàn)以小鼠胚胎為研究對(duì)象，在 CZB培養(yǎng)基中添加不同濃度黃芩苷，以探討黃芩苷是否可以提高體外培養(yǎng)小鼠胚胎卵裂率、囊胚發(fā)育率、囊胚細(xì)胞數(shù)和囊胚質(zhì)量，并通過胚胎發(fā)育重要基因的表達(dá)量變化來評(píng)價(jià)囊胚質(zhì)量，揭示黃芩苷促進(jìn)體外培養(yǎng)小鼠胚胎發(fā)育的機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)選用體內(nèi)和體外培養(yǎng)的小鼠胚胎，分別設(shè)對(duì)照組以及在培養(yǎng)基中添加黃芩苷（2、4和8μg/mL）實(shí)驗(yàn)組，觀察并

2、記錄2-和4-細(xì)胞卵裂率，桑葚胚和囊胚發(fā)育率，囊胚細(xì)胞數(shù)。用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）檢測各組胚胎發(fā)育相關(guān)基因GJA1和CDH1，應(yīng)激相關(guān)基因HSP70，凋亡相關(guān)基因BAX和BCL-2，DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因DNMT1和DNMT3a表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與體內(nèi)對(duì)照組比，體外培養(yǎng)胚胎各階段發(fā)育率極顯著降低(P<0.01)，添加黃芩苷后，與體外對(duì)照組比，2和4μg/mL黃芩苷顯著提高胚胎各階段的發(fā)育率(P<0.05)，其中，4μg/mL黃

3、芩苷組囊胚發(fā)育率（78.6±4.08％）極顯著(P<0.01)高于2μg/mL黃芩苷組（63.8±2.56%）和體外對(duì)照組（53.7±3.45%），低于(P<0.01)體內(nèi)對(duì)照組（90.3±5.07%）。而且，與體外對(duì)照組和其他黃芩苷組比，4μg/mL黃芩苷顯著提高囊胚細(xì)胞數(shù)(P<0.05)，并接近體內(nèi)組囊胚細(xì)胞數(shù)。與體內(nèi)對(duì)照組比，體外培養(yǎng)囊胚中GJA1，CDH1和BCL-2基因表達(dá)量下降，而HSP70，BAX和DNMT1基因表達(dá)量升高