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1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文人淋巴細(xì)胞NT3基因工程細(xì)胞的建立及鑒定姓名:麻曉峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):耳鼻咽喉科指導(dǎo)教師:高下20070427英文摘要ConstituteandidentifythemodelofNT3geneticengineeringLymphocyteAbstractIobjecfivc]Toestablishalymphocytelinewhichcouldsurvivealongertimeandexpressesh
2、umanNT3,EstablishthefoundationforthefollowinganimalandhumangenetranslZctionexperimentsineoehlea£lMethods】WithdrawedthehumanlymphocytefromthenormalhumanbloodviaFicollfluidandaddedIL一2intotheserumculturemediumtomakethelymp
3、hocytesurvivingalongertimeingoodgrowthconditionTheNT3eDNAwasgainedbyRTPCRAndwaSligatedwiththeeukaryonvectorwhichisplRES—DsRed2byT4DNAenzymeTheNT3eDNAgenewastransfectedintolymphocytelinebyusingcationicliposome(LP2000)Thel
4、ymphocytetransfectedwithNT3eDNAwasexaminedbyRTPCR,andWesternblotmethods【ResuRslEstablishedanewmethodtoextendthelymphocytessurvivaltimeinvitroandtransfectedNT3intolymphocytesuccessfullyAndthegeneticengineerlymphocytecould
5、survivealongertimeThepositivesignalsofproteinwereobtainedbyWesternblot【ConclusionslConstituterecombinedplasmidplRESDsRed2NT3,usinglymphocyteastheintermediarytotransfectNT3gene,thenwecouldgetalymphocytelinewhichcouldexpre
6、ssandsecreteNT3。TheaboveestablishedthefoundationforthefollowinganimalgenetranfectionexperimentincochlearAndwemayfindthegoodintermediarycellforcurethehumandeafnessviagenetherapy1KeyWordslneurotrophin3;genectone;lymphocyte
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